Лабораторная оценка белкового обмена. Энзимодиагностика. Лабораторная диагностика эндокринных нарушений: Учебное пособие, страница 3

2.  Относительная - наблюдается при сгущении крови из-за значительных потерь жидкостей (поносы, рвота, усиленное потоотделение, несахарный диабет, холера, перитонит, тяжелые ожоги).

Гипопротеинемия - это снижение уровня общего белка менее 65 г/л бывает:

1.  Относительная - при гидратации (водной нагрузке);

2.  Абсолютная:

a)   при недостаточном поступлении белка с пищей:

·  при голодании, сужении пищевода;

·  нарушенной функции ЖКТ.

b)  при уменьшении процесса биосинтеза белка:

·  хронические паренхиматозные гепатита;

·  за счет токсического влияния химических веществ на паренхиму печени;

·  при метастазах печени.

c)  за счет потери белка:

·  при острых и хронических кровотечениях;

·  при образовании обширных экссудатов (белки уходят в ткани);

·  при ожогах;

·  при нарушении почечной фильтрации в результате органического заболевания почек (так, при нефротическом синдроме общий белок снижается до 20-30 г/л).

d)  за счет усиленного распада белка:

·  злокачественные опухоли;

·  тяжелые инфекции;

·  сепсис;

·  лихорадка;

·  тиреотоксикоз.

Парапротеинемии - это появление в крови аномальных патологических белков.

Дефектопротеинемии - когда отсутствует какой-либо белок или целая фракция плазмы крови.

·  анальбуминемия;

·  афибриногенемия;

·  ацерулоплазминемия.

Диспротеинемия - это нарушение соотношения между белковыми фракциями.

Основным методом определения общего белка в сыворотке крови является биуретовый метод, в основе которого лежит реакция между солями меди и пептидными связями белков, в результате которой щелочной среде образуются комплексы ионов меди с белками фиолетового цвета.

Электрофорез белков плазмы

Метод электрофореза белков был введен в 1930 году Тизелиусом. Принцип метода электрофореза заключается в том, что белки, находящиеся в среде с определенной концентрацией ионов водорода, приобретают электрический заряд. Скорость движения белков зависит от молекулярной массы белка, величины заряда белковой молекулы, ее формы, степени гидратации, а также от вязкости раствора, ионной мощности буфера и других физико-химических свойств. Методом Тизелиуса было получено 6 белковых фракций плазмы крови и 5 классических фракций сыворотки. Метод Тизелиуса - это метод свободных или подвижных границ (использовался буфер, в который вносили смесь белков). Вместо свободного электрофореза в настоящее время используют зональный или электрофорез на различных средах-носителях. В качестве сред-носителя используется:

·  хроматографическая бумага;

·  ацетат-целлюлезные пленки;

·  различные гели: крахмальный, агаровый, полиакриламидный гель.

С помощью хроматографической бумаги, ацетат-целлюлезной пленки было выделено 5 обычных фракций белков.

На крахмальном геле и геле агарозе 7-12 фракций белков, а полиакриламидном геле 18-20, а по некоторым данным, и до 30 белковых фракций.

В 1964 году Грабаром открыт метод иммуноэлектрофореза. Это сочетание мотода электрофореза с иммунохимическим методом, при котором, помимо физико-химических свойств, белки разделяются и по иммунологическим свойствам, т. е. по их антигенной специфичности. Проводится на геле агара или агарозе. Благодаря этому методу  удалось выделить свыше 20 белков.

Основные электрофоретические фракции

1. Альбумин - наиболее подвижная фракция и является однородной. Однако, описаны случаи, когда фракция альбумина делится как бы на 2 части. Тогда говорят: «альбумин - А и альбумин - В» - бисальбуминемия. Это наследственный полиморфизм, но иногда наблюдается у больных, получающих большие дозы антибиотиков.

Этот белок быстро обновляется. Период его полураспада 7 дней. Это гидрофильный белок, молекула которого в воде увеличивается в 2 раза. Альбумин играет важнейшую роль в поддержании коллоидно-осмотического давления.

Ему также принадлежит важная транспортная и защитная роль. Связываясь с билирубином, гормонами, ионами кальция, железа, меди, альбумин транспортирует эти вещества и обезвреживает их токсическое действие.