Взвесь бактерий обрабатывают мутагеном (УФО) и разведения засевают на чашки с МПА. После инкубации выросшие колонии переносят с помощью репликатора на чашки с МПА и минимальным агаром. После инкубации в термостате производят сравнение роста колоний на обычном и минимальном агаре. Отсутствие роста колоний на минимальном агаре соответствует расположению колоний ауксотрофных мутантов на полноценном МПА.
На рисунке обведите красным карандашом колонии ауксотрофных мутантов.
Вывод: Штаммы 1-3 - АУКСОТРОФЫ (от греч. auxo - выращиваю - увеличиваю и trophe - пища, питание), микроорганизмы, утратившие способность синтезировать одно из веществ, необходимых для их роста (аминокислоту, витамин или др.). Без добавления в питательную среду этого вещества ауксотрофы не растут. Ср.
3►Изучить
и описать S- и R- -колония (англ. smooth— гладкий) - имеет круглую
форму, формы колоний энтеробактерий на
пластинчатом МПА.
Сравните культуральные свойства энтеробактерий в S- и R- форме (опишите колонии):
S
– колонии гладкая поверхность, ровные края .
R-колонии
(англ. rough — неровный) — характеризуется неровными краями и шероховатой
поверхностью.
4►
Изучить рост лактозоположительных и лактозоотрицательных
колоний эшерихий на среде Эндо (зарисовать).
Укажите формы изменчивости
Модификационная изменчивость - фенотипическая изменчивость– не затрагивает генотип. Модификации затрагивают большинство особей в популяции. Они не передаются по наследству и с течением времени затухают, т. е. возвращаются к исходному фенотипу.
Генотипическая изменчивость затрагивает генотип. В основе ее лежат мутации и рекомбинации. Мутации – изменение генотипа, сохраняющееся в ряду поколений и сопровождающееся изменением фенотипа. Особенностями мутаций у бактерий является относительная легкость их выявления.
5►Научиться учитывать опыты по трансформации, трансдукции, конъюгации.
Трансформация – передача генетической информации в виде изолированных фрагментов ДНК при нахождении реципиентной клетки в среде, содержащей ДНК-донора. Гриффитс 1928 год. Введение мышам пневмококков без капсулы вместе с убитыми вирулентными пневмококками, имеющими капсулу, приводило к появлению капсулы у этих пневмококков
Опыт по трансформации Генотип реципиента S. pneumoniae Capsula- → Донор S. pneumoniae Capsula+ → среда→Генотип рекомбинанта S. pneumoniae Capsula+
Трансдукция – это передача генетической информации между бактериальными клетками с помощью умеренных трансдуцирующих фагов.
Опыт по трансдукции Генотип реципиента Corynebacterium diphtheriae tox- → Донор Corynebacterium diphtheriae tox+→ бактериофаг →Генотип рекомбинанта Corynebacterium diphtheriae tox+
Вывод в результате передачи генетической информации путем Трансформации, Трансдукции и коньюгации бактерии приобретают новые свойства.
Конъюгация – обмен генетической информацией при непосредственном контакте донора и реципиента. Наиболее высокая частота передачи у плазмид, при этом плазмиды могут иметь разных хозяев.
Генотип реципиента E.Coli АБ-Генотип донора E.Coli СДЕ - → Генотип рекомбинанта E.Coli АВСДЕ-
Минимальная среда. Когда бактерии выращивали в U образной трубке разделенной фильтром, то рекомбинантов не было.
Вывод: передача генетической информацией при непосредственном контакте донора и реципиента.
6► Определение бактериоциногенности культур микроорганизмов.
Исследуемые культуры бактерий засевают уколом в чашку с МПА.
Выросшие культуры убивают парами хлороформа. После испарения хлороформа
поверхность агара заливается расплавленным и остуженным 0,7% МПА, смешанным с
индикаторной культурой. Учет результатов проводится через сутки после посева по
зонам подавления роста индикаторной культуры вокруг колоний, обладающих
бактериоциногенностью.
Вывод: Штаммы E.coli № 1-5 несут плазмиду бактериоциногенности , образуют колицины подавляющие рост индикаторного штамма E.coli.
Выявление генетических маркеров в реакции гибридизации нуклеиновых
Уважаемый посетитель!
Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).
Ссылка на скачивание - внизу страницы.