1. Определить концентрацию тимоцитов в выделенном тимусе (млн/мл). данные занести в таблицу 1.
Таблица 1.
№ п/п |
Количество подсчитанных клеток |
Количество клеток в рабочем растворе |
Количество клеток в 1 мл исходной суспензии |
1. контроль |
|||
2. облучение |
2. Определить исходные параметры спектров флуоресценции пирена. Данные занести в таблицу 2.
Таблица 2.
№ п/п |
Интенсивность флуоресценции, отн. ед. |
|||||||||
286 нм |
337 нм + пирен |
286 нм + пирен |
||||||||
330 |
373 |
385 |
393 |
470 |
330 |
373 |
385 |
393 |
470 |
|
1. контроль |
||||||||||
2. облучение |
3. На основании результатов, приведенных в таблице 2, произвести расчет показателей, характеризующих структурное состояние мембран, исходя из следующих соотношений:
1. Полярность аннулярного липида при lвоз= 286 нм I385/I373;
2. Полярность липидного бислоя при lвоз= 337 нм I385 /I373;
3. Микровязкость аннулярного липида при lвоз= 286 нм I475/ I373;
4. Микровязкость липидного бислоя при lвоз= 337 нм I475/ I373;
5. Степень тушения белковой флуоресценции пиреном:
Полученные данные занести в таблицу 3.
Таблица 3.
показатели Условия |
Полярность аннулярного липида |
Полярность липидного бислоя |
Микровязкость аннулярного липида |
Микровязкость липидного бислоя |
Степень тушения белковой флуоресценции пиреном, % |
1. контроль |
|||||
2. облучение |
4. На основании данных таблицы 3 построить диаграмму, иллюстрирующую влияние ионизирующего излучения на структурное состояние белкового и липидного компонента мембран тимоцитов. По оси Y откладывать величину признака в относительных единицах, по оси X – варианты экспериментов.
5. На основании полученных данных сделайте вывод о степени чувствительности компонентов биологической мембраны к действию ионизирующего излучения и о степени выраженности этого эффекта при различных типах радиационного воздействия. Обсудите полученные результаты с преподавателем.
Рекомендуемая литература.
1. Рыскулова С.Т. Радиационная биология плазматических мембран.Москва Энергоатомиздат.-1986.-126с.
2. Болдырев А.А. Биологические мембраны и транспорт ионов. – М.: Изд-во Моск. Ун-та, 1985.-208с.
3. Геннис Р. Биомембраны: Молекулярная структура и функции: Пер. с англ. – М.: Мир, 1997. – 624 с.
4. Биохимия мембран: Учебное пособие для биологических и медицинских спец. вузов / Под ред. Болдырева А.А. Кн. 1. Болдырев А.А. Введение в биохимию мембран. – М.: Высш.шк., 1986. – 112 с
5. Сунгуров В.А. Влияние ионизирующего излучения на клеточную поверхность. Москва: Наука .-1988.-259с.
6. Бурлакова Е.Б. Новые аспекты закономерности действия низкоинтенсивного облучения в малых дозах // Радиационная биология ,Радиоэкология .- 1999.-Т. 39.-Вып.-1.-С.26-34.
7. Добрецов Г.Е. Флуоресцентные зонды в иследовании клеток, мембран и липопротеинов. - М.: Наука, 1989. – 270с.
8. Богач П.Г. и др. Структура и функция биологических мембран / Учебное пособие. Киев: Вища школа. 1981. 336с.
9. Текучесть мембраны в биологии: Концепции мембранной структуры / Под ред. Р. Элоя; Пер. с англ.: З.В. Линевич. Киев. 1989. 303с.
10. Крепс Е.М. Липиды клеточных мембран. – Л.: Наука, 1981. – 330с.
Уважаемый посетитель!
Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).
Ссылка на скачивание - внизу страницы.