Биохимия и патобиохимия комплемента, его значение в биологии и медицине, страница 8

               Результат действия препаратов на систему комплемента зависит от дозы препарата. Так, низкие дозы кортикостероидов увеличивают синтез С3 макрофагами, в то время как высокие дозы угнетают его.

               Методы тестирования комплемента.

               Адекватное представление о состоянии системы комплемента может быть получено в результате оценки как количественных характеристик, так и функциональных показателей с учетом содержания субкомпонентов.

               Существуют несколько видов анализа системы комплемента:

1)  иммунохимический анализ ( иммуноэлектрофорез, радиальная иммунодиффузия, нефелометрия, радиоиммунные, иммунофлюориметрические и иммуноферментные методы);

2)  функциональный анализ (гемолитические методы).

Иммунохимический анализ.

Все иммунохимические методы основаны на использовании моноспецифических антисывороток. В настоящее время в химически чистом виде выделены практически все белки системы комплемента, с помощью которых получены специфические антисыворотки.

               Однако при исследовании комплемента иммунохимическими методами следует учитывать его свойство легко расщепляться на низкомолекулярные фрагменты  в процессе доставки и хранения сыворотки или плазмы, которые также будут реагировать с антисывороткой, что может привести к искажению результатов.

               Необходимо также отметить, что большинство иммунохимических методов, используемых для исследования системы комплемента, требуют значительных затрат времени.

               Наиболее существенным моментом, ограничивающим использование иммунохимических методов анализа системы комплемента, является то, что, используя данные методики, невозможно отличить функционально активные молекулы от неактивных. Эти результаты трудно интерпретировать: отмечая повышение или снижение того или иного компонента комплемента, невозможно установить, является ли данное изменение его содержания в сыворотке или плазме следствием активации или оно связано с процессами, происходящими in vitro.

               Литературные данные, касающиеся изучения концентрации компонентов комплемента иммунохимическими методами в норме и при различных заболеваниях, часто противоречивы и не всегда объяснимы. Еще одна проблема заключается в том, что для некоторых компонентов комплемента характерны довольно широкие колебания нормальных уровней и их средние значения в значительной степени отличаются у разных лиц. То есть, незначительное изменение содержания того или иного компонента не могут быть точно интерпретированы как активация или потребление. Иммунохимические методы не информативны при изучении генетической недостаточности комплементарных белков, так как не позволяют отличить дефектный белок от функционально полноценного. И если для доказательства активации комплемента при данной патологии с успехом могут применяться  иммунохимические методы, то для определения врожденного дефицита какого-либо компонента необходим функциональный анализ, поскольку многие дефекты системы комплемента являются функциональными: содержание определяемых иммунохимическими методами компонентов при этом нормальное.

               Функциональный анализ.

               Наиболее распространенными методами определения функциональной активности являются гемолитические методы СН50, СН100, которые успешно применяются в клинике для определения общей комплементарной активности.

               Тест-система включает в себя сенсибилизированные эритроциты барана, вызывающие активацию комплемента по классическому пути сборку МАК и лизис клеток. Активность комплемента определяется спектрофотометрически по вышедшему в результате гемолиза гемоглобину.