Аналитические основы клинической лабораторной диагностики, страница 8

Буферные растворы также можно составлять из смеси солей многоосновной кислоты, константы диссоциации которой сильно отличаются друг от друга, например, из смеси одно- и двузамещенных фосфатов. При разведении (до соотношения 1:100) рН буферного раствора практически не меняется, однако отражается на его емкости.

Буферная емкость — число молей сильной кислоты или сильного основания, добавление которого к буферному раствору изменяет его рН на единицу.

Буферная емкость тем больше, чем концентрированнее раствор. Буферные смеси не при всех соотношениях концентраций кислоты и соли проявляют свое буферное действие. Его оптимум отвечает той концентрации [Н+], при которой кислота является наполовину нейтрализованной.

Для приготовления буферных растворов необходимо использовать дважды перекристаллизованные реактивы квалификации «хч» и бидистиллированную воду.

Буферные растворы используются в тех случаях, когда анализ проводится при определенном значении рН, в частности в фотометрических методах, основанных на цветных индикаторных реакциях.

Индикаторами называются соединения, окраска которых изменяется в зависимости от изменения рН среды. Они принадлежат к различным типам органических соединений, но все — являются слабыми кислотами или слабыми основаниями. Их недиссоциированные молекулы окрашены иначе, чем диссоциированные. Но диссоциация не является единственной причиной изменения окраски. Согласно хромофорной теории индикаторов, окраска вещества, как и многие другие физические свойства, зависит от состава и строения молекулы.

Для получения окрашенных органических веществ необходимо присутствие в их молекуле определенных групп атомов — хромофоров.

Тип приготовления

Основные требования при выборе типа приготовления — максимальная простота в использовании реагента и гарантия наивысшего (по возможности) качества. Например, вещества в кристаллической форме легче взвешивать, чем лиофилизированные; использование готовых таблеток исключает взвешивание, но таблетки должны быстро и полностью растворяться. Гарантия качества связана с простотой приготовления, стабильностью и активностью. Растворы ферментов легче использовать, чем суспензию. Добавление к растворам консервантов исключает ежедневное приготовление, но консерванты не должны влиять на ход аналитического процесса.

Готовые аналитические формы реактивов, преимущества наборов.

Набор реактивов —это два или более лабораторных материалов, упакованных вместе, предназначенных для выполнения определенной процедуры и снабженные инструкцией.

Основными преимуществами использования готовых наборов реактивов являются:

·  сокращение расхода реактивов;

·  сокращение времени анализа за счет исключения этапов приготовления реактивов;

·  гарантия высокого качества, так как производители используют тщательно контролируемые реагенты, дают информацию об ограничениях применения, об интерференции патологических метаболитов и лекарств, о внешней оценке качества набора, выполненной самим производителем и профессиональными организациями.

Многие современные методы, используемые в клинической лабораторной диагностике, например, для определения гормонов, опухолевых маркеров и т. п., могут быть выполнены только с помощью готовых наборов, так как в условиях лаборатории невозможно приготовить все необходимые компоненты соответствующего качества для проведения анализа. Кроме того, приготовленные в лаборатории реагенты не пригодны для многих автоанализаторов.

Основные требования к наборам реактивов, принципы обеспечения качества.

При промышленном производстве готовых наборов реактивов необходимо соблюдать баланс между стоимостью, качеством и надежностью получаемых результатов, удобством применения (практичностью) и низкой интерференцией.

Практичность применения и низкая интерференция зависят от выбора метода, качество и надежность результатов — от качества и стабильности реагентов и их растворов.

Срок хранения набора при определенных условиях (например, в холодильнике) должен быть не менее б мес со дня выпуска.

Стабильность рабочих растворов должна сохраняться в течение недели (если возможно) и, по крайней мере, в течение рабочего дня.