Использование низкоэнергетических лазеров для улучшения результатов комплексного хирургического лечения больных механической желтухой неопухолевого происхождения, страница 4

Животные для исследования были распределены на 4 группы:

I – 45 крыс с экспериментальным холестазом. У них  исследовали кровь, брали участки печени на 5,10, 15 сутки,  наблюдали за продолжительностью жизни и состоянием. В каждый срок  выводили из опытов  10 животных.

II – 45 крыс с экспериментальным холестазом и подвергнутых действию НИЛИ. У них исследовали кровь, биоптатов печени на 5,10 и 15 сутки, наблюдали за состоянием и продолжительностью жизни. Облучение проводили, начиная с первых суток операции и в последующие дни, соответственно доведя количество сеансов до 5, 10 и 15. Время для забора крови и последующего исследования выбрано с учетом наиболее опасных периодов развития печеночной недостаточности (Рахелис С.Д. с соавт., 1974; Жидовинов Г.И., 1985, 1989). В каждый срок  выводили из опытов по 10 животных.

III – 6 здоровых крыс – контроль исходного состояния всех изучаемых показателей на первые и 15 сутки наблюдения;

IY – 4 крысы были подвергнуты 15-кратному действию НИЛИ – с целью контроля действия НИЛИ.

У 15 животных  I и II  групп (в каждой из них) с экспериментальным холестазом проводилось исследование продолжительности жизни. Распределение животных по группам опытов представлены в таблице 2.

Методы исследования

Экспериментальные методы:

2.2. Методика лазерного облучения

В эксперименте в послеоперационном периоде использовался полупроводниковый арсенид-галлиевый полупроводниковый лазер "Блазтер-4П", с длиной волны 0,89 мкм.  Мощность излучения в импульсе 10 мВт, при экспозиции 3 мин на одно поле (облучалось три поля через кожу) в проекции печени. Количество сеансов – от 5 до 15  в зависимости от поставленной задачи в каждой группе опытов.

В ходе эксперименте у животных облучалась область эпигастрия и правого подреберья, начиная с первых суток после операции моделирования холестаза. Сеансы проводились ежедневно, в одно и тоже время.

                    2.3. Группы эксперимента и методы исследований

Для оценки функционального состояния печени были использованы следующие критерии:

-  показатель холестаза: по уровню содержания в крови общей и прямой фракции билирубина мк/моль/час по İendrashic  (1937);

-  показатель цитолиза клеток печени: по уровню содержания трансаминаз – АЛТ и АСТ мкмоль/мл/час (Френкель[ЛР3] …., Райтман……1957);

-  показатель пигментно-детоксикационной функции печени: по уровню содержания в крови непрямой фракции билирубина , ответственного за токсическое действие, (Кобзарева В.И. и соавт., 1978; Колосов И.В. и соавт., 1997) по методу İendrashic (1937);

-  показатель синтетической функции печени: по уровню содержания в крови,  общего белка.

Для динамического наблюдения за аутоиммунным статусом животных [ЛР4] использованы противоорганные эритроцитарные антигенные диагностикумы (к печени, почке, сердцу, легким, тимусу, желудку, кишечнику) "Step-система", позволяющая выявлять гомологичные аутоантитела в сыворотке. Аутоантитела в сыворотке крови определяли микрометодом в РНГА (реакция непрямой гемаглютинации) в микротитраторе типа «Takachi». Для исследования использовали нативную сыворотку не позднее, чем через 2 дня после ее взятия. Диагностикумы готовились из крови и тканей соответствующих органов крыс «Wistar» В норме аутоантитела отсутствуют или их титр составляет 1:4[ЛР5] .