Энергия света, которая способствовала переходу электронов на более высокий энергетический уровень, была недостаточной, чтобы поддерживать это состояние стабильным. Необходимо также учитывать и тот факт, что Т - R переход является энергетически более выгодным и лимитируется доступностью лиганда для гемоглобина, в то время как R - Т переход требует дополнительного энергетического воздействия (148, 132, 165, 181).
Гемоглобин, к которому не присоединен лиганд, находится, преимущественно, в Т-форме, но в последнее время появились данные о том, что три-лигандированному оксигемоглобину тоже присуща Т-конформация, в то время как три-лигандированный карбоксигемоглобин всегда находится в R-конформации (122, 98, 139, 177, 149). Следовательно, факторы, способствующие переходу гемоглобина из R- в Т-конформацию создают предпосылки для образования оксигемоглобина. Это согласуется с данными наших экспериментов, в которых наблюдалось повышение концентрации оксигемоглобина и уменьшение концентрации карбоксигемоглобина после воздействия на карбоксигемоглобин лазерного облучения и раствора гипохлорита натрия.
Концентрация карбоксигемоглобина оказывала значительное влияние на эффективность реакции фотодиссоциации. Так, наиболее эффективной фотодиссоциация была при концентрации карбоксигемоглобина, равной 46 %. При повышении или понижении этой концентрации эффективность реакции фотодиссоциации значительно уменьшалась. Это связано с тем, что при концентрации, приблизительно равной 50 % кривая диссоциации карбоксигемоглобина имеет максимальный угол наклона, т.е. при этой концентрации воздействие, приводящее к уменьшению рСО, приводит к максимальным результатам.
Повышение температуры меняло качественные характеристики реакции фотодиссоциации в растворе карбоксигемоглобина - она становилась необратимой, т.е. отсутствовала спонтанная реассоциация лиганда с гемопротеидом в межимпульсный период. Зависимость реакции от температуры означает, что константа равновесия находится в простой зависимости от температуры, подчиняясь принципу Ле-Шателье (159, 160, 128, 119, 131). Реакция присоединения лиганда является экзотермической - идет с выделением тепла, диссоциация же карбоксигемоглобина происходит с поглощением тепла, являясь эндотермической реакцией. Следовательно, повышение температуры способствует активизации реакции диссоциации гемоглобина и угарного газа. Кроме того, повышение температуры может оказывать влияние на изменение конформации молекулы гемоглобина. Тепловая энергия может способствовать переходу электронов в молекуле гемоглобина из низкоспинового в высокоспиновое состояние. Это, в свою очередь, ведет к тому, что R-конформация будет переходить в Т-конформацию из-за изменения положения атома железа в порфириновом кольце, что ведет к уменьшению подвижности проксимального гистидина и структурным изменениям в области a1b2-контакта - образованию солевых связей. Образование или разрыв солевых связей и функционирует как «переключатель» с одной структуры на другую.
В последнее время в клинической практике широко используют гипохлорит натрия NaClO(). Это вещество оказалось эффективным бактерицидным средством, а также сильным детоксицирующим агентом широкого спектра действия. Гипохлорит натрия используется в методе непрямой электрохимической детоксикации (9, 54, 51, 29).
При добавлении 0,06 % раствора гипохлорита натрия к раствору дезоксигемоглобина увеличивалась концентрация метгемоглобина, что свидетельствует о способности гипохлорита окислять ионы Fe2+ до Fe3+ в растворе. При действии раствора гипохлорита натрия на раствор карбоксигемоглобина концентрация образующегося при этом метгемоглобина была значительно меньше, что говорит о более высокой устойчивости карбоксигемоглобина к окислению. Это объясняется, скорее всего, тем, что присутствие связанного лиганда стабилизирует молекулу гемоглобина in vivo (10, 115, 113, 118, 175).
Уважаемый посетитель!
Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).
Ссылка на скачивание - внизу страницы.