Микроскопический метод исследования. Простые и сложные методы окраски. Метод Грама

Практическое занятие № 1.

Тема: Микроскопический метод исследования. Простые и сложные методы окраски. Метод Грама.

Цель:    1. Ознакомиться с правилами противоэпидемического режима и ТБ в бактериологической лаборатории.

2. Овладеть микроскопическим методом исследования.

Знать:   1. Суть микроскопического метода исследования.

2 .Морфологию и структуру микробов.

3. Сущность и механизм окраски по Граму.

 Уметь: 1. Готовить фиксированные препараты из культур микроорганизмов.

2. Окрашивать по методу Грама.

3. Окрашивать по методу Зырянова.

4. Микроскопировать и интерпретировать полученные результаты.                                     

Контрольные вопросы

1. Правила работы в бактериологической лаборатории.

2. Микроскопический метод исследования и его значение в микробиологии.

3. Типы современных микроскопов. Правила микроскопии. Иммерсионная микроскопия.

4. Отличительные особенности эукариотических и прокариотических клеток.

5. Морфология бактерий: форма,  размеры, взаимное расположение.

6. Понятие о простых и сложных методах окраски

7. Структурные элементы бактериальной клетки (клеточная стенка, капсула, спора, зерна волютина), их диагностическое значение и методы выявления

8. Метод Грама, его сущность и назначение.

Задания, выполняемые в ходе занятия (УИРС):

1. Приготовить препарат из культур № 1 и № 2, окрасить по Граму, промикроскопировать и оценить полученные результаты.

2. Приготовить препарат из культуры № 3, окрасить по Зырянову, промикроскопировать и оценить полученный результат.

3. Промикроскопировать готовый препарат, окрашенный по Тружильо, оценить полученный результат.

4. Результаты занести в протокол.

Правила работы в учебных лабораториях кафедры микробиологии

1.  Вход в учебные лаборатории разрешается только в халате, колпаке и сменной обуви.

2.  В лабораториях запрещается принимать пищу, громко разговаривать, быстро передвигаться.

3. Запрещается зажигать спиртовки от горящих спиртовок, передвигаться по лаборатории с горящей  спиртовкой.

4. Категорически запрещается выносить культуры в посевах за пределы кафедры!

5. В случае загрязнения культурами микроорганизмов рабочих мест и пола необходимо сразу поставить в известность преподавателя и лаборанта и обработать места загрязнения дез. раствором.

6. Окна открывать только с разрешения преподавателя.

7. Запрещается сливать отработанные краски и воду после промывки препаратов в раковину. Отработанные краски сливаются в спец. тару и выносятся дежурным.

8. После окончания работы студенты моют мылом, а при необходимости обрабатывают их дез. раствором.

9. При порче имущества кафедры виновные производят ремонт за свой счет или возмещают стоимость ущерба.

Методические указания к выполнению исследовательского задания

1. Приготовление фиксированного препарата из культур микробов, растущих на плотной и жидкой питательной средах:

1.1 Для работы приготовьте обезжиренное предметное стекло, спиртовку, пробирку с физ. раствором, бактериологическую петлю и пробирку с культурой микроорганизмов или исследуемым материалом. Спиртовку до ее зажигания необходимо проветрить, приподняв фитиль и канюлю, чтобы выпустить пары спирта, скопившиеся в замкнутом пространстве. Спиртовка должна находиться на рабочем столе на удобном для работы расстоянии прямо перед Вами. Нельзя ставить спиртовку близко к краю стола и работать вдвоем одной спиртовкой. Для приготовления препарата необходимо выполнить следующее. Кладете перед собой обезжиренное предметное стекло, в левую руку берете пробирку с физиологическим раствором, в правую - бактериологическую петлю (как карандаш); прокаливаете петлю в пламени спиртовки; мизинцем и безымянным пальцем правой руки вынимаете пробку из пробирки и, проводя горлышком пробирки через пламя, забираете петлей физ.раствор; закрываете пробирку над пламенем спиртовки; каплю физ. раствора помещаете на предметное стекло, прикоснувшись к нему