Факторы и механизмы реактивности и резистентности организма: Методическая разработка для учебно-исследовательской работы студентов, страница 2

Для лечения ХЛЛ широко используются химиотерапевтические препараты, которые подавляют метаболические процессы и стимулируют апоптоз. Пациенты с ХЛЛ могут иметь различную чувствительность к цитостатическим препаратам. Часто в процессе лечения возникает резистентность, что приводит к неэффективности химиотерапии. Это может быть связано активацией синтеза белков, влияющих на транспорт и метаболизм лекарственных соединения в опухолевой клетке, например P-гликопротеина, кодируемого одним и из генов множественной лекарственной устойчивости. Блокированием апоптоза, индуцированного химиопрепаратами при мутациях гена р53 и сверхэкспрессии антиапоптотического гена Bcl-2, усилением в опухолевых клетках процессов репарации повреждений ДНК и других механизмов.

Методика проведения эксперимента

Опыт ставится на лимфоцитах, выделенных из периферической крови пациентов с хроническим В-клеточным лимфоцитарным лейкозом. Из венозной крови больных на градиенте плотности фиколл-верографин выделяют лимфоциты. Больной 1 находится на начальной стадии течения заболевания и не получает цитостатическую терапию. Больной 2 имеет развернутую стадию заболевания, частые рецидивы, наблюдается выраженный лейкоцитоз, лимфоцитоз.

Для выбора оптимальной схемы химиотерапии определяют чувствительность лимфоцитов периферической крови больного 1 и 2 к действию цитостатических препаратов. Лимфоциты культивируют в среде с добавлением различных концентраций препаратов. Оценку жизнеспособности клеток проводят по их метаболической активности с помощью МТТ-теста через 48 часов культивирования. Основным показателем МТТ-анализа является изменение метаболической активности лимфоцитов, выраженное в процентах от контрольного значения для интактных клеток. Для расчёта изменений жизнеспособности берётся среднее арифметическое значений, полученных в трёх дублях каждого разведения препарата. Результаты эксперимента регистрируются и протоколируются.

Результаты эксперимента

Методическая разработка подготовлена аспиранткой МГЭУ им. А.Д.Сахарова Сергиенко Т.Ф. на основе результатов собственных экспериментов, доцентом кафедры экологической медицины и радиобиологии Меркуловой И.П.