Постановление об утверждении Инструкции по эпидемиологии, клинике, лечению, лабораторной диагностике и профилактике легионеллеза

высеваются на селективный субстрат агар-агара для легионелл и  инкубируются. После инкубации характерные в морфологическом отношении колонии, выросшие на селективном субстрате, следует определять как предположительные легионеллы. Предполагаемые колонии подтверждаются путем определения ростовых требований в отношении L-цистеина и железа. При идентификации по виду необходимы дополнительные серологические тесты.

26.1.  Метод поверхностного посева

Метод поверхностного посева применяется, прежде всего, в том случае, если ожидаемое число легионелл превышает 10 в литре. Этот тип проб может требовать разведения сцелью сокращения числа организмов, не являющихся легионеллами, и тем самым ограничения возможности их чрезмерного роста относительно более медленно растущих легионелл. Пробы могут разводиться жидкостью Рингера. Приготовленные растворы следует тщательно размешать, встряхнув их либо воспользовавшись микро встряхивающей машиной в течение не менее 2 минут. Привить как минимум по 3 пластинки с субстратом GVPC пробой объемом от 0,1 мл до 0,3 мл, не подвергавшейся обработке. Распределить жидкий инокулюм по всей поверхности пластинки, используя шпатель или петлю. Записать объем высеиваемого образца.

26.2. Метод мембранной фильтрации

Метод мембранной фильтрации применяется в случае исследований образцов неизвестного происхождения, а также в случае образцов с предполагаемым малым количеством бактерий легионелл. Чаще всего высеваются исследуемые образцы объемом 10, 100 и 500 мл. в случае многочисленной сопутствующей микрофлоры, существующей, например, в циклах охлаждающей воды, рекомендуется параллельное фильтрование меньших объемов воды, например, 1,0 мл либо 0,1 мл., если объем фильтрованного образца меньше 20 мл, в воронку аппарата, при закрытом кранике, следует влить около 20 мл жидкости Рингера, затем следует ввести исследуемый образец воды требуемого объема. Эта процедура позволит равномерно рассеять микроорганизмы в фильтруемом образце и сделает возможным равномерный рост колонии на мембранном фильтре. При фильтровании различных объемов проб воды всегда следует помнить о последовательности фильтрования от наименьшего до наибольшего объема пробы, тогда не возникает необходимость обжигания воронки фильтрационного аппарата во время очередного фильтрования того же самого образца. Воронку фильтрационного аппарата следует всегда обжигать перед фильтрованием новой пробы воды. После фильтрования определенного объема пробы воды через мембранный фильтр для сокращения сопутствующей микрофлоры при закрытом фильтрационном аппарате следует залить фильтр кислым буферным