Хроматография. Методы фракционирования биологических жидкостей: электрофорез, хроматография

Страницы работы

Фрагмент текста работы

меньше в растворе; другие – наоборот → смесь постепенно разделяется на составные части. Каждая часть сосредотачивается в своём слое – образуется хроматограмма. Каждая часть соответствует какому-то одному химическому соединению.

Основные  виды   хроматографии

В зависимости от природы взаимодействия, обусловливающего распределение компонентов между элюентом и неподвижной фазой, различают хроматографию:

ØАдсорбционная

ØРаспределительная

ØИонообменная

ØЭксклюзионная (молекулярно-ситовая): гель-проникающая и гель-фильтрация

ØОсадочная

Виды хроматографии (продолжение)

Адсорбционная хроматография основана на различии сорбируемости разделяемых веществ адсорбентом (твёрдое тело с развитой поверхностью).

Распределительная хроматография основана  на разной растворимости компонентов смеси в неподвижной фазе и элюенте

Ионообменная хроматография основана на различии констант ионообменного равновесия между неподвижной фазой (ионитом) и компонентами разделяемой смеси

Эксклюзионная (молекулярно-ситовая) хроматография основана на разной проницаемости молекул компонентов в неподвижную фазу (высокопористый неионогенный гель). Гель-проникающая: элюент - неводный растворитель,  гель-фильтрация: элюент - вода.

Осадочная хроматография основана на различной способности разделяемых компонентов выпадать в осадок на твёрдой неподвижной фазе.

Виды  хроматографии (продолжение)

Виды хроматографии (продолжение)

В зависимости от устройства:

vКолоночная – сорбентом заполняют специальные трубки- колонки, а подвижная фаза движется внутри колонки, благодаря перепаду давления. Разновидность - капиллярная (тонкий слой сорбента наносится на стенки капиллярной трубки).

vПлоскостная – перемещение подвижной фазы происходит благодаря капиллярным силам. Делится на тонкослойную и бумажную. В тонкослойной хроматографии тонкий слой гранулированного сорбента или пористая плёнка наносится на стеклянную или металлическую пластинки; при  бумажной хроматографии используют специальную хроматографическую бумагу.

Приборы для хроматографического анализа

Приборы для хроматографического анализа -  хроматографы.

Позволяют производить анализ веществ и  препаративное разделение смесей веществ.

Качественный хроматографический анализ -  осуществляют по времени выделения детектируемого вещества.  При колоночной хроматографии определяют время от момента ввода пробы до выхода каждого компонента из колонки при данной температуре и при использовании определённого элюента. При бумажной хроматографиии  - по скорости перемещения пятен веществ относительно скорости растворителя.

Количественный анализ -  определяют высоты или площади хроматографических пиков с учётом коэффициентов чувствительности используемого детектирующего устройства к анализируемым веществам (при колоночной) или измеряют интенсивность окраски вещества (при бумажной).

Сорбенты   хроматографического анализа

Основные параметры сорбента, имеющие значение для разделения веществ:

Размеры частиц

Качество материала сорбента

Возможность химической модификации сорбента

Влияние  размера  частиц  сорбента на  качество  хроматографии

Крупные частицы (30-200 мкм при высоте колонки 1 м) – малая скорость

Похожие материалы

Информация о работе

Тип:
Конспекты лекций
Размер файла:
55 Kb
Скачали:
0