Современные новые методы диагностики инфекционных болезней. Метод геноиндикации: Учебно-методическое пособие

реакция и транскрипционная амплификация обеспечивают не только быстрое получение результатов, но обладают также большей чувствительностью в сравнении с традиционными методами идентификации.

Цель:Получение знаний и практических навыков по новым методам диагностики инфекционных заболеваний – методам генной индикации.

Задачи:

·  Знать особенности преаналитического этапа метода ДНК-гибридизации.

·  Знать метод гибридизации ДНК и РНК: схема постановки, реагенты, условия и учёт результатов.

·  Знать метод полимеразной цепной реакции: схема постановки, реагенты, условия и учёт результатов. Возможные ошибки.

·  Иметь навыки в постановке диагностических реакций.

·  Уметь оценить полученные результаты и выдать заключение по проведенному исследованию.

Практические навыки:

·  Сбор и доставка патологического материала.

·  Особенности обработки материала для проведения ДНК-гибридизации.

·  Особенности обработки материала для проведения ПЦР

·  Ознакомление с оборудованием изспользуемым для проведения ДНК-гибридизации.

·  Ознакомление с оборудованием изспользуемым для проведения ПЦР.

Основные учебные вопросы:

1.  Метод гибридизации ДНК и РНК в диагностике бактериальных и вирусных инфекций.

2.  Полимеразная цепная реакция в диагностике бактериальных и вирусных инфекций. Ограничения метода.

3.  Индикация некультивируемых форм бактерий.

4.  Перспективы развития метода геноиндикации.

5.  Использование для лечения и профилактики инфекционных заболеваний методов генной инженерии. Перспективы.

6.  Методы изучения генетики микроорганизмов. Методы обнаружения плазмид.

Основная литература:

1.  А.Н. Маянский Микробиология для врачей (очерки патогенетической микробиологии). Нижний Новгород: Изд-во НГМА, 1999.

2.  Медицинская микробиология. Часть первая./ Под. ред. А.М. Королюка и В.Б. Сбойчакова. –СПб., 1999. – 272с.

3.  Медицинская микробиология./ Под. ред. В.И. Покровского. –М.:ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 1999.

4.  Конспект лекций.

Дополнительная литература:

1.  : Медицинская микробиология, иммунология и вирусология: Учебник для мед. вузов./ Под ред. А.И. Коротяева, С.А. Бабичева –СПб.: СпецЛит, 2000.

Вспомогательные материалы по теме.

ГЕНОИНДИКАЦИЯ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Обнаружение и идентификация возбудителей инфекционных заболеваний представляет собой одну из важнейших задач микробиологии. Решение этой задачи обеспечивается богатым арсеналом методических приемов, начиная от классических методик микробиологического тестирования и заканчивая иммунохимическими и молекулярно-биологическими методами. В каждом случае характер и сложность диагностических приемов зависят от биологии искомых возбудителей инфекции, которые претерпевают адаптивные изменения под воздействием экологических факторов, антибактериальной терапии и т.д.

Поэтому в последние годы все чаще и чаще традиционные, а порой и недавно наиболее перспективные методы диагностики оказываются недостаточными или принципиально неприменимыми. В связи с этим в настоящее время при проведении диагностических исследований стремятся к выявлению в исследуемых образцах специфических фрагментов нуклеиновых кислот патогенов.

Одним из наиболее часто применяющихся с этой целью методов является гибридизация специфических последовательностей нуклеиновых кислот (зондов) с фрагментами генома искомых патогенов, с помощью которой проводят обнаружение в исследуемых образцах, идентификацию возбудителей до вида, рода или семейства, дифференцируют патогенные и непатогенные штаммы одного вида (токсигенные и нетоксигенные Escherichia coli. Vibrio cholerae, Yersinia enterocolitica и т.д.). Зонды представляют собой меченные радиоактивными