Нефелометрия, турбидиметрия (иммунотурбидиметрия, лазерная нефелометрия, агрегатометрия, коагулометрия)

Нефелометрия, турбидиметрия (иммунотурбидиметрия, лазерная нефелометрия, агрегатометрия, коагулометрия)

Нефелометрия— вид оптического анализа, в основе которого лежит измерение светового потока, рассеиваемого в направлении, обычно почти перпендикулярном направлению его падающего пучка. Светорассеяние имеет место в том случае, если размеры встречаемых на пути света частиц превышают длину волны электромагнитного излучения. Чем мутнее дисперсная система, тем больше она рассеивает света и тем меньше пропускает. В определенных условиях наблюдается пропорциональная зависимость между содержанием частиц во взвеси (либо капелек в эмульсии) и ее мутностью.

Иначе говоря, принцип нефелометрии заключается в измерении количества света, рассеиваемого частицами в жидкой среде. Оптимальные условия его применения состоят в использовании растворов низкой концентрации.

Турбидиметрия представляет собой разновидность нефелометрии, при использовании которой частичная непрозрачность анализируемой среды измеряется путем оценки снижения интенсивности падающего светового потока. Поглощение монохроматического светового потока происходит в случае, если длина волны электромагнитного излучения оказывается значительно меньше, чем размеры частиц. Турбидиметрия — менее чувствительный метод по сравнению с собственно нефелометрией, поскольку для турбидиметрического анализа используются среды с относительно большим содержанием частиц в единице объема.

Если при использовании собственно нефелометрии падающий на кювету монохроматический световой поток и приемник излучения (фотоэлемент) находятся под прямым (или близким к нему) углом, то при применении турбидиметрии источник света и приемник излучения располагаются на одной линии.

В последние годы в практику клинико-лабораторного обследования пациентов широко внедряются технологии иммунотурбидиметрических исследований, направленных на оценку иммунного статуса организма и установление содержания в плазме (сыворотке) крови так называемых специфических белков (в том числе белков «острой фазы»), что имеет большое значение для диагностики, оценки эффективности лечения и прогноза различных заболеваний внутренних органов.

Все определяемые методом нефелометрии (иммунотурбидиметрии) вещества представляют собой белки, содержащиеся в основной внеклеточной жидкости — плазме (сыворотке) крови в относительно большом количестве.

Среди них:

1)  факторы гуморального иммунитета: иммуноглобулины А, G, М, СЗ- и С4-компоненты комплемента, каппа- и лямбда-цепи, пропердиновый фактор В;

2) специфические белки (белки «острой фазы»): альфа-1-кислый гликопротеин, альфа-1-антитрипсин, альфа-2-макроглобулин, бета-2-микроглобулин, церулоплазмин, гаптоглобин, С-реактивный белок, трансферрин, ревматоидный фактор, орозомукоид, преальбумин;

3) апопротеины (белковый компонент атеро- и антиатерогенных липопротеинов): апопротеин А1, апопротеин В;

4) другие белки плазмы (альбумин);

5) белки мочи (микроальбумин).

Методы лазерной нефелометрии и иммунотурбидиметрии основываются на регистрации протекающей в жидкой среде реакции «антиген — антитело», сопровождающейся образованием соответствующего преципитата. О ходе реакции можно судить как по установлению степени мутности системы «в конечной точке» (т.е. через вполне определенный промежуток времени — статическая нефелометрия