Влияние хронического стресса, вызванного ежедневным вынужденным плаванием животных на пассивное поведение в течение процедуры плавания

Отчет о выполненной преддипломной институтской работе за 1-й семестр

студентки 4-го курса ФЕН НГУ кафедры физиологии

Баблюк Екатерины Владимировны

Известно, что психогенный стресс нередко приводит к развитию нервно-психических расстройств, в частности, реактивным депрессиям, посттравматическим стрессовым расстройствам, в структуре которых депрессивный синдром занимает существенное место. В последнее время накапливаются данные, содержащие элемент физического контакта со стрессогенным фактором. Данных о влиянии на структуру поведения животных «чистой» психической травмы, т.е. не связанных с физическим воздействием острых негативных эмоциональных переживаний, в литературе практически нет.

В течение этого семестра я принимала участие в эксперименте лаборатории функциональной нейрогеномики института цитологии и генетики СО РАН, который имеет непосредственное отношение к моей дипломной работе.

Были поставлены следующие цели:

1.  доказать влияние хронического стресса, вызванного ежедневным вынужденным плаванием животных на пассивное поведение в течение процедуры плавания (тест Порсолта);

2.  исследовать влияние хронического стресса, вызванного ежедневной иммобилизацией животных в тесных клеточках на количество потребляемой сахарозы;

3.  выявить зависимость между временем пассивного поведения во время процедуры плавания и количеством потребляемой сахарозы;

4. сравнить показатели (прирост массы тела, количество потребляемой сахарозы, уровень потребления жидкости) групп животных, подвергаемых разному типу стресса между собой и с контрольной группой животных.

В работе использовали 30 двухмесячных самцов крыс линии Вистар массой 180-280 г. Животных содержали в течение эксперимента по одному в клетке в условиях вивария ИЦиГ СО РАН: при температуре 22-24°С, естественном освещении и свободном доступе к воде и корму. Перед началом эксперимента животных разделили на 3 группы таким образом, чтобы средняя общая масса крыс каждой группы была одинакова. В каждой клетке находилось две емкости с жидкостью: в одной чистая вода, в другой-1%-ный раствор сахарозы.

Для первой группы животных в качестве стрессорного воздействия был использован тест вынужденного плавания. Тест состоял из 15-ти минутного вынужденного плавания животного. Крыс помещали в стеклянный цилиндр (46 х 20 см), наполненный водой до высоты 30 см. Помещение животного в воду активирует попытки выбраться. Затем эта активация сменяется пассивным поведением, характеризующимся только движениями, необходимыми для поддержания головы над водой. Эпизоды пассивного и активного поведения чередуются в течение пребывания животного в воде. Поведение регистрировали с помощью видеокамеры. В дальнейшем производили подсчет длительности эпизодов пассивного поведения. После окончания процедуры вынужденного плавания животных тщательно вытирали и возвращали в домашние клетки. Длительность эксперимента – 2 недели.

Вторая группа животных в течение 2-х недель подвергалась иммобилизации путем помещения в узкие клеточки на час. По истечении времени крыс возвращали в домашние клетки.

Третья группа животных служила контролем и не подвергалась никаким стрессорным воздействиям.

В течение эксперимента, ежедневно производилось взвешивание животных, а так же емкостей с водой и сахарозой на электронных весах. Данные заносились в журнал.

Предварительные результаты оценки влияния хронического стресса на продолжительность пассивного плавания показывают, что данное воздействие оказало достоверное воздействие на показатель депрессивно-подобного состояния. Статистическая обработка результатов проводилась с помощью однофакторного дисперсионного анализа (one-way ANOVA), который выявил эффект перенесенного стресса на длительность пассивного поведения. (F 6,13 = 3,0322, p<0,05)

График зависимости времени пассивного поведения в тесте вынужденного плавания, секунды(ось Оу) от продолжительности тестирования , дни(ось Ох)

Примечание: дни эксперимента объединены в пары для наибольшей наглядности

      В дальнейшем планируется исследовать центральные эффекты срессорных воздействий. Для  последующего иммуногистохимического выявления продуктов целевых генов были подготовлены мозги животных. В этом семестре я принимала участие в подготовке на этапах перфузии и фиксации мозга, насыщения его сахарозой, заморозки и приготовления фронтальных срезов с помощью замораживающего микротома, окрашивании пробных срезов первичными и вторичными антителами и анализе полученных препаратов с помощью люминесцентного микроскопа.

16.12.2011