Ковалентное связывание димеров позволяет избежать их быстрой диссоциации и замедляет элиминацию модифицированного гемоглобина почками, а также решает проблему с повреждением почек димерами свободного Hb. Используя реакцию гемоглобина с аналогом 2,3-ДФГ, можно уменьшать его сродство к О2 и тем самым увеличивать доставку кислорода к тканям. Для дальнейшей стабилизации кросс-сшитого гемоглобина применяется полимеризация. Период полувыведения модифицированных Hb составляет от 3 до 30 ч, в зависимости от введенной дозы, вида животных, степени полимеризации. Их Р50 соответствует примерно 30-35 мм рт.ст.
Кросс-сшивание проводится путем ацетилирования гемоглобина ацетилсалициловой кислотой или бис-(3,5-дибромсалицил)-фумаратом (DBBF), диэтилом дибромацетилсалициловой кислоты при физиологических значениях рН. Среди стабилизированных гемоглобинов наиболее изученным является DCLHb (diaspirin cross-linked haemoglobin) или HemAssist® (Baxter), созданный описанным способом с помощью DBBF.
DCLHb получают лизированием человеческих эритроцитов с последующей очисткой, деоксигенированием и обработкой DBBF для создания ковалентных связей (фумаратных мостиков) между a-цепями. Затем после нагревания удаляются лишние белки и несвязавшиеся субъединицы гемоглобина, производится реоксигенация и повторная очистка препарата.
Конечный продукт представляет собой раствор, обладающий следующими свойствами: DCLHb 10 г/100 мл; рН (37оС)=7,4, осмотичность — 290 мОсм/л, коллоидно-онкотическое давление (37оС)=44 мм рт.ст. Хранится препарат в течении 1 года при — 20оС и 1 день при комнатной температуре. DCLHb не имеет антигенных свойств, не требует типирования и определения совместимости. Из-за того, что кривая диссоциации оксигемоглобина сдвинута вправо, сродство к кислороду снижено. Благодаря присутствию внутримолекулярных мостиков DCLHb связывает меньше СО2, чем молекула обычного гемоглобина, и это количество не зависит от парциального давления СО2, который может занимать только половину центров связывания.
Растворы модифицированного гемоглобина активно исследовались на экспериментальных моделях геморрагического шока и обменного переливания крови, и были получены хорошие результатами. Отмечалось восстановление показателей гемодинамики, поддержание оксигенации периферических тканей на удовлетворительном уровне, в некоторых исследованиях общая выживаемость составила до 80%. Введение DCLHb было примерно столь же эффективным, как введение крови, и более эффективным, чем введение больших объемов раствора Рингера с лактатом, в отношении системной гемодинамики и насыщения смешанной венозной крови кислородом. Однако следует отметить, что последний из эффектов был кратковременным. В исследованиях не отмечены поражения органов (почек, сердца, нервной системы) или иммунные реакции. Степень повышения АД зависела от количества введенного препарата, легко достигала стационарного уровня и контролировалась введением антигипертензивных препаратов. Такое действие достигалось ингибированием NО, увеличением образования эндотелина и повышением чувствительности и/или потенцированием a1- и a2-адренорецепторов.
DCLHb эффективен при различных состояниях, сопровождающихся развитием ишемии тканей в силу своей низкой вязкости и малого размера молекул.
Доставка кислорода тканям при развитии сепсиса не соответствует их потребностям. Общее сосудистое сопротивление снижено, что ведет к уменьшению систолического и диастолического давления. Введение DCLHb повышает АД, не снижая кровотока в органах брюшной полости и почках. Однако он может резко ухудшить состояние в случае гипертензии легочной артерии и артериальной гипоксемии, наблюдаемой у свиней при введении эндотоксина.
Уважаемый посетитель!
Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).
Ссылка на скачивание - внизу страницы.