Введение в ксенобиологию. Механизмы активного транспорта токсических веществ через биологические мембраны (Лекции № 1-8 по дисциплине "Ксенобиология и биотестирование"), страница 3

Как следует из этого уравнения, значение поверхностного натяжения зависит:- от обьема капли водного раствора данного ве-ва, образующейся в липидном слое растительного масла,-от диаметра капилляра, через который пропускают  водный  р-р непосредственно в слой масла,-от удельной  плотности этого р-ра и масла Все эти величины определяются экспер-но:

          -Для определения обьема капли раствора, содержащего испытуемое ве-во используют установку, собранную на лабораторном штативе. Она представляет собой пипетку с делениями и стеклянный капилляр, соединенные между собой резиновым шлангом в одну систему. Вначале заполняют эту систему водой. Для этого подставляют стакан с водой под капилляр так, чтобы его конец был погружен в воду. Затем подсоединив насадку к свободному концу пипетки медленно втягивают воду в систему с помощью насадки или резиновой груши. После заполнения этой системы водой устанавливают мениск в пипетке на нулевую отметку. Далее, вместо стакана с водой под капилляр таким же образом подставляют стакан с растительным маслом. После этого (снимают насадку с пипетки и зажав ее свободный конец пальцем) направляют поступление воды в растительное масло, регулируя скорость потока так, чтобы можно было сосчитать число образующихся капель в толще растительного масла.  Насчитав 10 капель поток воды ч\з капилляр прерывают, и отмечают обьем истекшей воды по шкале пипетки. Разделив этот обьем на число капель, получают обьем одной капли. Операцию повторяют дважды (двукратная повторность) и находят среднюю величину из двух определений.

Далее систему освобождают от воды и заполняют ее водным раствором испытуемого ве-ва. Всю процедуру повторяют снова

          -Для определения диаметра капилляра используют микрометр, или микроскоп с акулярмикрометром.

          -Для определения удельной плотности испытуемых р-ров используют аналитические весы 2 класса. Точный обьем ра-ра взвешивают вместе со стеклянным бюксом. Затем определяют массу ра-ра вычитая, из этой величины массу бюкса и рассчитывают плотность, разделив массу раствора на его обьем. Полученные экспериментально величины, а также справочные данные подставляют в формулу для расчета силы поверхностного натяжения. Разницу между значениями поверхностного натяжения чистой воды и ра-ра испытуемого ве-ва использут для оценки мембранотропных св-в этого ве-ва. 

3. Биотесты

Методы исследования свойств ксенобитиков с помощью живых биологических систем в лабораторных условиях называются биотестами.

          Лабораторный практикум включает  2 работы с использованием биотестов при  изучении цитологических свойств   токсикантов.

- Действие токсиканьов на циклоз цитоплазмы клеток

- Мембранотропные свойства токсикантов

- Действие токсикантов на циклоз цитоплазмы клеток

          Циклозом  называют явление активного движения цитоплазмы. Циклоз обеспечивает ряд биологических функций цитоплазмы т.к транспортная, благодаря которой осуществляется кинетика веществ внутри клетки и обмен между органеллами кислородом, углекислым газом, метаболитами. Регуляторная за счет гомеостатирования и оптимизации условий биохимических процессов внутри клетки. Защитная,  путем выведения токсичных вев и метаболитов из клетки.

Циклоз является активным биологическим процессом, который осуществляется работой специальных ресничек, раположенных пристенно с внутренней стороны плази)малеммы клеток. Реснички состоят из белка тубулина6 аналогичного по струтуре и функции белкам актиномиозонового комплекса мышечных тканей. Поэтому они способны активно сокращаться приводя в направленное движение цитоплазму. Различают несколько типов активного движения цитоплазмы  ротационное, циркуляционной, фонтанирующее и др. в зависимости от особенностей строения и специализации клетки. 

          В связи с этим циклоз является интегрирующим показателем цитологической  активности ксенобиотиков, который количественно оценивается по скорости циклоза в биотестах. В качетве биотеста используют различные клетки с выраженным циклозом в том числе и гигантские клетки харовой одноклеточной водоросли нителла флексилис (текучая нить). Одна клетка этой водоросли достигает 5 см вдлину.