Процесс спорообразования от +12 до +42оС - если t выше или ниже, то спора не образуется, процесс спорообразования длится от 1-2 до 70 часов. При попадании на питательную среду спора прорастает ч/з 5-10 мин до 2-3 часов. Bас. anthracis крупный микроб Гр+, неподвижный. Образует капсулу в организме и спору, при неблагоприятных условиях.
Образует капсулу только на питательных средах с добавлением до 40 % сыворотки крови крс. Капсула состоит из трёх слоёв (внутренняя часть – кислые мукополисахариды; средняя - белково-полисахаридный комплекс; наружная-мукопептидами и полипептидами).
Для окраски капсулы лучше фиксировать мазки спиртом с 5% формальдегидом или 3% р-ром перекиси водорода 15 мин. Устойчивость и длительность выживания вегететивных клеток и их спор различны. В невскрытом трупе бациллы ч/з 2-3 дня разрушаются от протеолитических ферментов, в костном мозге сохраняются до 7 дней.
t=60оС до 15 мин. t=100оС моментально. При t=2-4оС в сохраняется 2 недели, в желудочном соке гибнет за 30 мин. В замороженном мясе до 15 дней. При t=-10оС – 24 дня. Могут сохраняться даже при t=-196оС - 24 часа. Спирт, эфир, 2% р-р формалина, 5% р-р фенола, 5-10 % хлорамина обезвреживает микроб в течение 5 мин.
Споры гораздо устойчивее – из-за наличия дипиколиновой кислоты. Высушивание выдерживают десятки лет. Прямой солнечный свет 4 дня. УФ-20 часов. Сухой жар 120-140оС 2-3 часа, 150оС-1 час, текучий пар 100оС 12-15 мин. В автоклаве при 0,5 амт обезвреживается за 5-10 мин.
Кипячение обезвреживает за 1 час. 25% спирт переносят 50 дней; 5% р-р фенола несколько суток; 2% р-р формалина, 4% перманганата калия – 15 мин, 5-10 % р-р хлорамина за 2 часа, 10% р-р щёлочи – 2 часа. Возбудитель сибирской язвы обладает изменчивостью. Под влиянием низких доз пенициллина бациллы приобретают форму шаров.
Могут меняться культуральные свойства. Колонии R формы - шероховатые-нормальные; O-промежуточные формы; S-гладкие формы. Может меняться и вирулентность. Степень вирулентности возбудителя проверяется на кроликах. Вводят три различные дозы-10, 100 тыс и 1 млн спор/мл.
Соответствующими взвесями заражают по 2 кролика п/к в области живота. Наблюдают в течение 10 сут. При гибели: от 10 тыс. спор - культура высоко вирулентная; от 100 тыс. и 1 млн.- умеренно вирулентная. Слабо вирулентные и авирулентные штаммы не вызывают гибели кроликов.
Биопроба:используют белых мышей или морских свинок заражают подкожно 0,2-0,5 мл, свинок 0,5 мл – 1 мл. Гибель заражённых животных наступает ч/з 1-3 сут, а наблюдают за ними до 10 дней. У возбудителя сибирской язвы находят три группы антигенов. 1)Соматический Аг (в теле клетки) - полисахарид учавствует в РП.
2)Капсульный на эти Аг защитных Ат в организме не образуется. 3)Протективный Аг содержится в экзотоксине и на него образуются защитные антитела-иммунитет антитоксический, а не антимикробный. Протективный Аг используют для приготовления химических вакцин, добавляют 0,1% формалина и используют как вакцину.
Поставить диагноз сложно, особенно при абортивном течении, атипичном проявлении. Диагностика комплексная: -эпизоотологический; -патологоанатомический; -аллергический (используют аллерген-антраксин в/к для людей); -лабораторные методы: бактериологический, серологический, фагодиагностика
Фагодиагностика р-я жемчужного ожерелья. Материалы для лабораторной диагностики (вскрывать трупы нельзя) 1.Кровь из уха или кусочки уха у трупа на той стороне, где лежит-перетягивают в двух местах лигатурами и отрезают ухо. 2.Кровь из кончика уха, обрабатывают и делают надрез, но лучше всего сразу приготовить мазки.
Часть фиксируют, а часть не фиксируют, чтобы сохранить капсулы. При случайном вскрытии отправляют селезёнку, легочные лимфоузлы. Пробы кож для РП. Ч/з 5 дней труп вскрыть можно, не опасен. От свиней – участки отёчной соединительной ткани и заглоточные, подчелюстные, другие лимфатические узлы в которых есть пат. изменения.
Сырьё животного происхождения (шерсть, мех), почва. В лаборатории готовят мазки, микроскопируют окрашивают по Граму, делают посев для выделения чистой культуры. Культурой или патматериалом заражают лабораторных животных. Если материал не свежий, а загнивший, то бактериология нерезультативна.
Серологические методы: РП, Р диск П, МФА, РПГА для ускоренной диагностики-определяют наличие сибироязвенного Аг в сыворотке крови. Сроки исследования: -микроскопического в день поступления материала; -бактериологического до 3-х сут; -биологического до 10 сут.
© 2005 Kenneth Todar University of Wisconsin-Madison Department of Bacteriology МФА с использованием капсульных сибироязвенных сывороток
Биопрепараты: 1.В-ны СТИ и из «штамма 55», приготовленная из штаммов наследственно утративших способность к капсулообразованию. Контроли: -чистоту роста; -на реактогенность-образование отёков у лабораторных животных; -иммуногенность на морских свинках;
-к-во спор СТИ- 25-35 млн спор в мл жидкой вакцине, шт «55»-50 млн спор сухой вакцине; -безвредность на кроликах-3 мл при п/к введении. 2)Противосибироязвенная сыворотка больным п/к. 3)Противосибироязвенный глобулин –гамма и бета глобулиновые фракции противосибироязвенной сыворотки. 4)Антибиотики.
5)Бактериофаги «К» ВИЭВ, «Гамма» МВА.
Дифференциация от антракоидов
Уважаемый посетитель!
Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).
Ссылка на скачивание - внизу страницы.