1. Время определения - 2,5 мин.
2. При подозрении на спонтанную агглютинацию у больных с АВ (IV) производят контрольное исследование с 0,9% NaCl.
Реакция должна быть отрицательной.
При определении Rh-фактора:
1. Соотношение исследуемой крови и сыворотки 1 кап : 1 кап.
2. Время определения - 3 мин.
3. После добавления 0,9% NaCl перемешивают переворачиванием пробирки.
Определение группы крови с применением известной группы крови.
1. Для определения используют только Ab (II) или Ba (III) группы крови.
2. Центрифугируют (или отстаивают) известную и исследуемую кровь.
3. Отмывают полученные эритроциты 0,9% раствором NaCl.
4. Смешивают известную и исследуемую сыворотки с исследуемыми и известными эритроцитами (соответственно).
5. Учитывают полученные результаты согласно таблице:
-+-+++----++-+- a(сыв) Ba (III) B(эр) b(сыв) |
0ab (I) |
Ab (II) |
Ba (III) |
AB0 (IV) |
||||
+ Ab(II) A(эр) |
||||||||
Пробы на индивидуальную совместимость.
По группе:
1. Сыворотку крови (отцентрифугированную) реципиента смешивают с кровью донора (по общим для определения групп крови правилам).
2. При отсутствии агглютинации в течение 5 мин. - кровь совместима и наоборот.
По Rh-фактору:
1. Сыворотку крови (отцентрифугированную) реципиента смешивают с кровью донора (по общим для определения Rh-фактора правилам).
2. Добавляют 33% р-р полиглюкина.
3. При отсутствии агглютинации в течение 5 мин. - кровь совместима и наоборот.
Определение пригодности крови.
Запрещается использовать кровь и ее компоненты, если:
1. Отсутствует или неправильно заполнена этикетка, истек срок годности.
2. При наличии признаков недоброкачественности: гемолиза, сгустков, хлопьев, пленок.
3. При нарушении герметичности сосуда.
Ошибки при определении групповой принадлежности:
1. По техническим причинам:
а) неправильное расположение сывороток на планшете, б) неправильное количественное соотношение в) грязная или мокрая посуда, промывание пипеток водой или использование одной пипетки для разных сывороток, г) неправильная запись исследуемой крови, д) несоблюдение времени определения.
2. Ошибки, зависящие от применения неполноценных стандартных сывороток:
а) слабый титр (ниже 1:32), б) истекший срок годности, в) несоблюдение условий хранения, инфицирование сывороток.
3. Ошибки, зависящие от биологических особенностей исследуемой крови:
а) слабая агглютинабельность эритроцитов (наличие погрупп крови и экстраагглютинов), б) неспецифическая агглютинация эритроцитов. Причины:
· сенсибилизация эритроцитов тепловыми или холодовыми аутоантителами;
· для опред. группы крови эритроциты отмывают 0,9% NaCl (элюция аутоантител): 37 °C - при наличии холодовых и 56 °С - тепловых аутоантител;
· некоторые инфекционные заболевания, сопровождающиеся септицемией (протеолитические ферменты некоторых бактерий активизируют Т-агглютиноген эритроцитов) - панагглютинация.
· Для устранения неспецифической агглютинации планшет помещают в термостат при t°=37°C на 5 мин, после чего неспецифическая агглютинация исчезает, а истинная - остается.
в) псевдоагглютинация (монетные столбики). Чаще возникает при длительном наблюдении и отсутствии покачивания.
При добавлении физ.раствора - исчезает.
г) агглютинация, маскированная гемолизом (при наличии в сыворотке активных гемолизинов). Гемолиз предотвращают разведением сыворотки физ. раствором или прогреванием ее в течение 30 мин при t°=56°C.
д) агглютинация, обусловленная наличием в сыворотке антител другой групповой системы (M, N, L и др.).
е) выпадение фибрина. Связано с избытком CaCl2в тестовых реактивах.
ж) кровяные химеры: истинные (у гетерозиготных близнецов, после пересадки аллогенного костного мозга) и трансфузионные (при многократном переливании О(I) группы пациентам с другой группой крови). У близнецов химеризм может быть всю жизнь, в остальных случаях он нестоек.
з) особенности крови у новорожденных связаны со слабой агглютиногенностью эритроцитов и нередки отсутствием в течение первого года жизни агглютининов a и b.
Уважаемый посетитель!
Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).
Ссылка на скачивание - внизу страницы.