Антигенные системы эритроцита

дополнительных «антиглобулиновых» антител — антител к глобулинам человека (проба Кумбса). В этой реакционной среде имеет значение расстояние между специфическими антиген-связывающими центрами двух антител класса 1gG. А два эти антитела в свою очередь связаны специфическим антителом к глобулинам человека. Соответственно расстояние между участками молекул иммуноглобулинов, связывающими антигены эритроцитов, значительно превышает 18 нм.

Наряду с антиглобулиновым тестом еще одним способом, повышающим чувствительность реакции агглютинации эритроцитов антителами класса 1gG, является «ферментный» тест. В результате предварительной обработки эритроцитов протеолитическими ферментами (папаин, бромелин, трипсин и др.) происходят два процесса, облегчающие непосредственное взаимодействие молекулы 1gG с антигенами эритроцитов:

— удаление большинства составляющих клеточной мембраны, обусловливающих ее отрицательный заряд (остатки сиаловых кислот на гликофори-нахА,В,С, В);

— удаление с поверхности клетки гликопептидов, затрудняющих доступ молекулы 1gG- к липидному бислою мембраны.

Ограниченность ферментного метода обусловлена тем, что протеазы повреждают некоторые антигены групп крови (М, N. s, Gerbich, Fу ^а,1n^а/1n^ь, Сromer). В то же время ряд клинически значимых антигенов (Rh, Di, К, Jk) остаются сохранными.

В последние годы внедряются в практику новые иммуногематологичес-кие методы (микропланшетный, гелевый, твердофазный), позволяющие стандартизировать и автоматизировать процедуры определения антигенов эритроцитов и антител к ним.

Физическая природа связи антигена и антитела состоит в межмолекулярных нековалентных взаимодействиях: электростатические силы, водородные связи, гидрофобные эффекты, силы Ван дер Ваальса. Прочность этих связей зависит от изменений рН, ионной силы, температуры, свойств окружающей жидкости.

Связь антигена и антитела специфична и обратима. Диссоциация иммунного комплекса, при которой антитело отделяется от антигена клеточной поверхности, называется элюцией.

Взаимодействие антигенов эритроцитов и антител к ним проявляется реакцией агглютинации.

Картина агглютинации определяется концентрацией взаимодействующих структур :

— при избытке антител агглютинаты не образуются вследствие отсутствия свободных эпитопов («прозона»);

— при приблизительно равном соотношении антигенных детерминант и молекул антител развивается видимая агглютинация («зона эквивалентности»);

— при дефиците антител агглютинаты не образуются вследствие связывания единичных молекул иммуноглобулинов с отдельными клетками («постзона»).

Наличие антител к эритроцитам может также проявляться гемолизом вследствие разрушения мембраны комплементом, активированным комплексом антиген-антитело. Опосредованный антителами гемолиз не развивается в отсутствие комплемента или в плазме, содержащей кальций-связывающий антикоагулянт (цитрат, ЭДТА). При условии, что изначально сыворотка не была гемолизированной и при тестировании не добавлялись гемолитические агенты, гемолиз в супернатанте — признак реакции антиген-антитело.

Методы, основанные на реакции агглютинации, наиболее распространены в практике службы крови.

Фактически реакция агглютинации протекает в две стадии:

— стадия сенсибилизации: соединение антител с антигенами мембраны эритроцита;

— стадия гемагглютинации: соединение сенсибилизированных клеток в видимые агглютинаты.

Это разделение довольно условно и полезно для понимания процесса, происходящего in vitro. Фактически обе стадии протекают одновременно, и гемагглютинация