Градуирование спектроскопа и определение длины световой волны по градуировочной кривой. Изучение режима работы ртутно-кварцевой горелки, изучение люминесцентных свойств веществ

Показатель поглощение света, коэффициент пропускания света, оптическая плотность. Регистрация спектров поглощения биологических объектов. Фотоколориметрия.

3. Рассеяние света. Нефелометрия.

4. Фотобиологические процессы.

Приборы и материалы: Фотоколориметр КФК-3, кюветы разной длины, дистиллированная вода, растворы красителя разной концентрации.

Согласно цели работы, необходимо экспериментально показать прямопропорциональную зависимость оптической плотности D от концентрации растворенного вещества С и оптического пути l D=e^.C^.l. Нужно помнить, что закон справедлив только для очень разбавленных растворов. Кроме того, кнопка оптической плотности на панели управления КФК-3 обозначена как А.

Для осуществления поставленной цели мы проведем два опыта. Отдельно покажем прямопропорциональную зависимость оптической плотности вещества от концентрации растворенного вещества в растворе, и отдельно – прямопропорциональную зависимость оптической плотности вещества от оптического пути. Измерять оптическую плотность красителя будем на длине волны максимума спектра поглощения красителя.

Ход работы:

1.  Включите КФК-3, и прогрейте прибор в течение 10-15 минут.

2.  В кювету сравнения налейте дистиллированную воду, а в опытную кювету – раствор красителя. Последите за тем, чтобы на стенках кюветы не осталось капелек жидкости или других пятен. Вытрете кювету чистой тряпочкой.

3.  Поместите кюветы в соответствующие кюветные отделения и, согласно инструкции снимите спектры поглощения красителя относительно дистиллированной воды (зависимости коэффициента поглощения света и относительной плотности вещества от длины волны света). Показания прибора снимайте через каждые 10 нм, а в области экстремума через каждый 1 нм.

4.  Данные измерений занести в таблицу 1.

Таблица 1

5.  По данным таблицы 1 постройте спектры поглощения красителя.

По оси абсцисс отложить длины волн в диапазоне 350 нм ÷ 650 нм , по оси ординат пропускание (П) в процентах  0 ÷ 100%, и оптическую плотность D в относительных единицах в интервале 0÷1.

На систему координат нанести полученные в опыте величины и соединить их сглаживающей кривой.

Проанализируйте спектр поглощения красителя. В выводе укажите линейчатый или сплошной спектр поглощения у красителя, опишите форму спектра поглощения красителя, укажите длину волны света, на которой наблюдается экстремум спектра поглощения.

1.  Установите длину волны монохроматора прибора соответствующую максимуму поглощения исследуемого раствора

2.  Возьмите две кюветы с оптическим путем 1см. Первую наполните дистиллированной водой, а вторую наполняйте растворами красителя разной концентрации: Запишите оптические плотности красителя в этих случаях.

3.  Данные занесите в таблицу 2.

Таблица 2

4.  По данным таблицы 1 постройте график зависимости оптической плотности раствора от концентрации красителя.

По оси абсцисс отложить концентрации раствора 0 ÷ 10% , по оси ординат пропускание (П) в процентах  0 ÷ 100%, и оптическую плотность D в относительных единицах в интервале 0÷1.

На систему кординат нанести полученные в опыте величины и соединить их сглаживающей кривой.

5.  Найдите коэффициент пропорциональности (экстинкцию) в формуле для оптической плотности раствора красителя для максимума поглощения нм.

Как видно из формулы D=e^.C^.l экстинкция имеет размерность М^-1.см^-1. Продифференцируем эту формулу по l при условии постоянства