Методы диагностики вирусных инфекций. Основы систематики вирусов. Взаимодействие вирусов с клеткой. Серодиагностика вирусных инфекций: Учебно-методическое пособие

фоне практически полного отсутствия средств специфической химиотерапии. Во-вторых, на моделях вирусов (как наиболее просто организованных формах жизни) разрешают многие фундаментальные вопросы биологии (например, об интронах, сплайсинге или онкогенах).

Выявление, культивирование и определение количественного содержания вирусов — «золотой стандарт» в диагностике вирусных инфекций.

Цель: получение знаний по основам структуры вирусов, систематики и этапам взаимодействия вирусов с клетками; а также получение практических навыков по вопросам выделения, индикации и идентификации вирусов.

Задачи:

1.  Знать современные принципы систематики вирусов

2.  Знать этапы взаимодействия вирусов с клеткой.

3.  Знать методы культивирования вирусов:

а) в клеточных культурах (первичных, полуперевиваемых и перевиваемых),

б) в куриных эмбрионах,

в) в организмах животных.

4.  Освоить методы обнаружения (индикации) вирусов:

а) по цитопатическому действию,

б) по реакциям гемагглютинации и гемадсорбции,

в) по бляшкообразованию,

г) по внутриклеточным включениям.

5.  Знать методы титрования вирусов.

6.  Знать серологические методы в диагностике вирусных инфекций, особенности их использования.

7.  Уметь собирать и доставлять и проводить обработку патологического материала.

8.  Иметь навыки в постановке диагностических реакций.

9.  Уметь оценить полученные результаты и выдать заключение по проведенному исследованию.

Практические навыки:

·  Сбор и доставка патологического материала.

·  Обработка патологического материала с целью удаления бактериального загрязнения.

·  Получение первичных клеточных культур.

·  Приготовление питательных сред для культивирования клеток in vitro.

·  Заражение куриных эмбрионов.

·  Заражение культур клеток.

·  Обнаружение цитопатического эффекта в культурах клеток.

·  Постановка реакции гемагглютинации и реакции торможения гемагглютинации.

·  Оценка результатов реакции гемадсорбции по окрашенным препаратам

·  Выдача заключения по проведенному исследованию.

Основные учебные вопросы:

1.  Понятие о вирионе и вирусе Современные принципы систематики вирусов. Структура вирионов. Химический состав вирионов.

2.  Вирусспецифические белки: ферменты вириона и вирусиндуцированные белки клетки.

3.  Репродукция вирусов. Основные стадии взаимодействия вирусов с клетками хозяев при продуктивной инфекции

4.  Особенности вирусных инфекций. Инфекционность вирусных РНК и ДНК. Тропизм вирусов

5.  Клеточные культуры (первичные, полуперевиваемые и перевиваемые). Куриные эмбрионы и организмы животных как модели для размножения вирусов.

6.  Методы обнаружения (индикации) вирусов по цитопатическому действию, по реакциям гемагглютинации и гемадсорбции, по бляшкообразованию, по внутриклеточным включениям

7.  Методы титрования вирусов

8.  Серологические методы в диагностике вирусных инфекций, особенности их использования

Задания для самоподготовки и УИРС:

·  Методы культивирования вирусов в клеточных культурах и индикации вирусов в них.

·  Методы культивирования вирусов в куриных эмбрионах и в организмах животных. Методы обнаружения вирусов в данных системах.

.Основная литература:

1.  Букринская А.Г. Вирусология.—М.:Медицина, 1986.-336с.

2.  Клиническая лабораторная аналитика./ Под ред. В.В. Меньшикова. Том IV. Частные аналитические технологии в клинической лаборатории. – М.:ООО «Агат-Мед.», 2003. – с.623-696.

3.  Маянский А.Н Микробиология для врачей (очерки патогенетической микробиологии). Нижний Новгород: Изд-во НГМА, 1999.

4.  Медицинская микробиология./ Под ред. В.И. Покровского. –М.:ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 1999. – с.453-462.

5.  Конспект лекций

Дополнительная литература:

1.  Медицинская микробиология, иммунология и вирусология: Учебник для мед. вузов./ Под ред. А.И. Коротяева, С.А. Бабичева –СПб.: СпецЛит, 2000,.

2.  Общая вирусология./ Под редакцией В.М. Жданова, С.Я. Гайдамович. Москва, Медицина, 1982, т. l., т.2.

Вспомогательные материалы по теме:

а. Образцы клинического материала. Выявление, культивирование и определение количественного содержания вирусов (табл. 29-1) — «золотой стандарт» в диагностике вирусных инфекций. Однако объективные сложности — необходимость определённого времени для репродукции возбудителя (от нескольких суток до недель), необходимость содержания штата квалифицированных сотрудников и перманентный риск заражения — ограничивают применение этих методов в работе бактериологических лабораторий лечебных учреждений. Образцы следует отбирать как можно раньше либо с учётом ритма циркуляции возбудителя. При транспортировке образцы помещают в различные растворы и среды, наиболее часто в раствор Хенкса, содержащий пенициллин (100 000 ЕД/мл), гентамицин