Характеристика вируса бешенства и болезни Ауески. Лабораторная диагностика. Биопрепараты

Характеристика вируса бешенства и болезни Ауески.

 Лабораторная диагностика. Биопрепараты.

    Вирус бешенства относится к семейству Rhabdoviridae, род Lyssavirus, вид Rabies virus. РНК содержащий, однонитчатый с оболочкой, нейротропный.

     Бешенство особо опасная болезнь, остропротекающая с поражением ЦНС.

     Болеют теплокровные ж-е и человек. Болезнь проявляется буйством, параличами и агрессивностью обычно с летальным исходом. Зооантропонозное заболевание.

     Форма проявления:

1.  буйная.  2. паралитическая, тихая.

     Регистрируется в различных странах земного шара. Не регистрируется в в Японии, Австралии, Великобритании. Холоднокровные не болеют.

     Симптомы.  Инкубационный период от нескольких недель до 1 года. В среднем от 2 до 8 недель.

     Время инкубационного периода зависит от вида животного, возраста, резистентности, количества попавшего в организм вируса и его вирулентности, места локализации и характера раны. Чем меньше рана, чем она дальше от головы длина инкуб.периода больше.

     По чувствительности к бешенству животных делят на 4 группы:

1.  лисицы, шакалы, волки, кайоты хомяки, скунцы, еноты,  (природные очаги, вспышка через 2-3 года).

2.  кошки, КРС.

3.  собаки, овцы, козы, лошади, приматы.

4.  Птицы.

     Поражается головной и спинной мозг, слюнные железы, роговица глаза.

     Вирус попадает в организм чаще через укусы или повреждения кожи и попадания слюны.

     Патогенез.  Вирус попав со слюной в организм на месте укуса может находится до 2-х недель, далее по нервным стволам до ЦНС, а из головного мозга центробежно в слюнные железы и роговицу.

     Для исследования при жизни посылают слюну, отпечатки с роговицы. Посмертно головной мозг (аммониевы рога, мозжечок), слюнные железы и роговицу, поясничный отдел спинного мозга.

     При бешенстве может быть скрытое течение болезни, носительство и редко выздоровление.

     У КРС - болезнь протекает как атония рубца, отказ от корма, т.к.паралич глотки, слюнотечение. Признаки корова подавилась.

     Для буйной формы устремление вперед, старается сорваться с привязи, хрипло мычит, бросается на припятствия, течет слюна.

     Паралитическая встречается чаще. Нарушена координация движений. Снижение аппетита и удоя, температура 40-41^оС. Запрокидывание головы. Смерть через 3-6 дней.

     У овец, свиней, лошадей протекает болезнь в 2-х формах: буйной и паралитической.

     У лисиц исчезает чувство страха, могут нападать на животных и людей или становятся очень ласковыми.

     У собак в буйной форме или тихой. Буйная форма через 8-11 дней после покуса. Собака бросается на ж-х и человека, извращенный аппетит, грызет разные предметы. Хриплый голос.

     Тихая форма - затрудненное глотание, слюнотечение, паралич нижней челюсти, конечностей. Гибель через 2-4 дня.

     У человека от заражения до начала болезни проходит 15-45 дней и до 3-месяцев, а может быть до года. Смерть от начала болезни через 5-7 дней с явлениями гидрофобии, аэрофобии, параличей и судорог. Страшнее болезни чем бешенство для человека нет.

     Само заболевание известно давно 2300 лет до н.э. было описано 5 признаков болезни.

     У собак 1.открытый рот

     2. слюнотечение (как веревка свисает).

     3. голос хриплый.

     4. уши свисают.

     5. хвост висит.

     У человека первым описал Корнелий Цельс в 1 веке н.э. Гидрофобия - боязнь воды. Заразительность слюны установил в 1804 г Цинке. В 1882 г-1885 Пастер и Ру доказали тропизм вируса к нервной ткани.

     Пастер с учениками проводил пассаж через мозг кролика и вирус сократил инкубационный период до 5-6 дней и при подкожном введении не вызывал болезнь. Такой вирус был назван fixe, т.е. фиксированным, который используется при приготовлении вакцины. 133 пассажа.

     Батист спас детей от бешеной собаки, сам был покусан. За детей ему дали премию в 1000 франков.

     В 1886 году Мечников и Гамалея открыли станцию по прививкам в Одессе, Москве и СПб.

    1887 г. Бабеш (румын) и 1903 г. Негри (итальянец) обнаружили тельца включения - поэтому они называются Бабеша-Негри.

     1890 г. Ру и Нокар описали заразительность слюны за 3-8 дней до клинических признаков.

    1885 г., 6 июля была сделана первая вакцинация вирусом fixe  мальчику 9 лет (Жозеф Мейер) 14 покусов. А позже пастуху Батисту.

     1903 г. Ремленже и Риффат-бей- доказали что возбудитель бешенства вирус.

     1907 г. Ферми приготовил вакцину из головного мозга зараженных вирусом fixe кроликов. Вакцина сухая сейчас не применяется, давала осложнения.

     Вирус бешенства.

     РНК, уличный 80-180 нм, пулевидной формы. Вирус fixe сферический “о” не чувствителен к эфиру, хлороформу. РНК вируса нитьевидная имеет фермент РНКа зависимую РНК полимеразу. Спиральный тип симметрии.

     Имеет 2 оболочки капсида и пеплос (сеперкапсида) с выступами. Вирус имеет 5 белков, транскриптазу 5 генов, содержит липиды 22 %.

     Размножается в цитоплазме клетки где и образует тельца включения.

     НК вируса однонитчатая имеет 22 больших витка и на одном конце 5 уменьшающихся витков. Это и придает вид пули.

     Антиген вируса преципитирующий, комплемент связывающий, содержит антиген во внутренней оболочке вируса. В наружной есть антиген - гемагглютинин улавливается в РТГА (эритроциты гусей), вирус нейтрализующий антиген и цитолизины.

     Устойчивость - довольно устойчив к воздействию физических, химических и биологических факторов, но термолабилен. 50^оС убивает за 1,5 часа, а 56 - 15 минут, 60 - 10 мин, 80-100 - 1 минута.

     При температуре + 4 в кусочках головного мозга сохраняется несколько месяцев. Температура - 20-4- несколько лет. Лиофильновысушенный 3-4 года.

     Губительно действует формалин, лизол, сулема, хлорамин. УФЛ - 5-10 мин.

     Глицерин 50% консервирует при + 4 до 90 дней.

     В земле на глубине 1 метр до 5 недель

     В головном мозге в трупе - 5-90 дней.

     Культивируется в условиях лаборатории

А) через мозг кролдиков

Б) б.мышей в кончик носа и в мозг, наблюдать 30 дней.

В) КЭ - 7дневные в желток и на ХАО.

Г) КТ-почек хомяков, свиней, телят.

     В культуре клеток не вызывает дегенерацию ткани, нет ЦПД.

     Вирус бешенства обладает изменчивостью по РН различают 4 серотипа вируса.

     По патогенности 6 групп сильно и слабо патогенные на данный момент различают следующие виды вируса.

1.  Природный (уличный).

2.  Fixe фиксированный получен от погибшей коровы от бешенства Пастером. Антигенные свойства вируса уличного и фиксированного оказались идентичными.

3.  Fluri получен от девочки и адаптирован к мозгу 1-дн.цыплят, затем к КЭ через заражение в желточный мешок. Проведено несколько тысяч пассажей.

4.  Вирус дикования (от песцов), оленей арктической.

5.  Kelev-6 от собаки вирус SAD.

     Вариант Fluri (Lep, Hep) - высоко пассажированные варианты утратили патогенность для всех видов живых организмов, при любом виде и методе заражения, в мозгу не образует тельца включения Бабеша-Негри.

Дифференциация вируса уличного и fixe

№№	признаки	уличный	fixe
1	Инкубационный период	От 14 до 30 дн.	5-6 дн.
2	Введение подкожно	бешенство	-
3	Клиника	Буйное, паралитич.	-
4	Тельцы Бабеша-Негри	+	-
5	В слюнной железе	+	-
6	Через укус	передается	нет
7	форма вируса	пулевидная	сферическая
8	размер	180 нм	120 нм
9	Патогенность кроликам п/к	+	-

Диагностика

Болезни комплексная

Лабораторные методы – вирусологический и серологический.

1.  для вирусологического метода присылают головной мозг (мозжечок, продолговатый, аммониевы рога, слюнные железы, роговицу глаза).

     Из присланного материала готовят мазки или отпечатки, гистосрезы, мазки из роговицы глаза можно готокить при жизни = тампон. Мазки фиксируют лучше в ацетоне и окрашивают вирус образует тельца включения, которые видны при окрашивании по Михину и Муромцеву, при обычной микроскопии.

      Находят вирус в мазках в виде телец-включения, которых может быть много или мало, что зависит от стадии протекания болезни.

     Для люминисцентной микроскопии используют метод флюоресцирующих антител.

2. Для выделения вируса проводят биопробу на белых мышах сосунках заражают в головной мозг или п/к в кончик носа