N.B!
Уробилиноген в общий ток кровообращения (и в мочу) в норме не попадает
(подвергается распаду в печени с образованием дипирролов). Появление
уробилиногена в моче является ранним (доклиническим) признаком поражения
паренхимы печени.
Распад уробилиногена
в кишечнике
В просвете толстого кишечника уробилиноген восстанавливается
в стеркобилиноген под действием кишечной флоры (при подавлении кишечной флоры
антибиотиками, СА и другими препаратами этот процесс нарушается) → большая
часть превращается в стеркобилин и выделяется из кишечника с калом → некоторое
количество стеркобилиногена всасывается через слизистую оболочку толстого
кишечника, попадая в систему нижней полой вены, минуя печень идет в почки и
выделяется с мочой.
N.B!
В норме в моче содержится стеркобилиноген (за сутки выделяется 1-6 мг у
взрослых). Используемые в КДЛ методы не позволяют дифференцировать стерко- и
мезобилиноген. Поэтому о наличии мезобилиногена в моче судят по возрастанию
общего количества экскретируемых с мочой пигментов и с учетом клиники
Определение уровня билирубина
В клинической практике
определение БР в сыворотке применяют для решения следующих задач:
•
Выявление увеличенного содержания
БР в тех случаях, когда при осмотре больного желтуха не выявляется или ее
наличие вызывает сомнение.
•
Объективная оценка степени
билирубинемии.
•
Дифференциальная диагностика
различных видов желтух.
•
Оценка течения заболевания путем
повторных исследований.
Определение билирубина –
преданалитический этап
Ø
Липемия и гемолиз сыворотки
искажают материалы исследования. Липемия приводит к ошибочно завышенному
результату. Гемолиз сыворотки – ошибочно заниженные результаты.
Ø
Материал нельзя держать на
свету. Воздействие прямого солнечного света уже к исходу первого часа может
снижать на 50% уровень БР(на этом основано фотолечение новорожденных).
Ø
Проба должна анализироваться в
течение 2 часов с момента взятия при хранении при комнатной температуре в
темноте, или в течение 12 часов при хранении в холодильнике в темноте.
Ø
Выражена интерференция лекарств
- на общий БР- левомицетин, тетрациклин, аспирин, акрихина (за счет
гемолиза), на конъюгированный БР - препараты, вызывающие холестаз: никотиновая
кислота, а также пенициллин, эритромицин, СА, пероральные контрацептивы,
эстрогены, андрогены, инсулин и др.
Общий БР
в сыворотке крови
Норма -3-20,5 мкмоль/л.
Метод Индрашика – цветная реакция с
диазофенилсульфоновой кислотой (диазореактивом).
Прямые спектрофотометрические методы (λ=450нм)
применяются как экспресс-методы для диагностики гипербилирубинемий
новорожденных (у взрослых -интерференция небилирубиновых пигментов сыворотки
(каротиноидов).
Неконъюгированный БР (гидрофобное вещество) дает
трудную – непрямую реакцию с диазореагентом. Поэтому его называют непрямой.
Конъюгированный БР (хорошо растворим в воде) дает быструю прямую реакцию с
диазореактивом и называется прямой билирубин.
N.B! Неконъюгированный БР = непрямой БР
Конъюгированный БР = прямой БР
Зависимость выраженности
желтухи от концентрации БР
Конъюгированный
и неконъюгированный БР обладают интенсивно красящей способностью. Появление
желтухи отмечается при уровне БР 34 мкмоль/л и более. При концентрации общего
БР до 85 мкмоль/л – легкая желтушность, 86-169 – средне-тяжелая, 170 и более –
тяжелая.
Определение конъюгированного и
неконъюгированного БР
Прямой (конъюгированный) БР в сыворотке –норма –
0-3,4 мкмоль/л – определяют в прямой реакции с диазореактивом
(розово-фиолетовое окрашивание). Позволяет проводить дифдиагностику желтух.
Повышается при паренхиматозной и механической желтухе (одновременно несколько
повышается и неконъюгированный). При гемолитической – не изменяется.
Непрямой (неконъюгированный) БРопределяют
расчетным путем - общий минус прямой. Норма – 3,4-16 мкмоль/л (составляет 75%
от общего). Играет важную роль в диагностике гемолитических анемий.
Определение содержания билирубина
в моче
•
Качественные пробы (БР под
действием окислителя превращается в изумрудно-зеленый биливердин). Проба Розина
– наслаивают спиртовой раствор йода на мочу → при наличиии БР на границе –
зеленое кольцо. Проба Гаррисона-Фуше – мочу смешивают с хлоридом бария,
перемешивают, фильтруют, затем на фильтр наносят 2-3 кп реактива Фуше (водный
раствор ТХУ с хлорным железом) → зеленое пятно.
•
Полуколичественные методы -
сухая химия.
