Острые лейкозы. Лабораторная диагностика: Учебно-методическое пособие, страница 2

Если суммарное содержание эритроидных клеток меньше 50%, диагностируется МДС. Таким образом, в отсутствие эритроидного преобладания сохраняет свою силу основной диагностический критерий ОМЛ — 30% и более бластов от всех ядерных клеток костного мозга. Исключение составляет лишь МЗ вариант ОМЛ, когда в цитологическом составе пунктата преобладают атипичные промиелоциты, а не миелобласты.

В случае эритроидного преобладания (50% и более эритрокариоцитов в пунктате костного мозга) необходимо определить процент бластов внутри неэритроидной популяции. Содержание в неэритроидной популяции 30% и более бластных клеток соответствует диагностическому критерию М6-варианта ОМЛ, а при меньшем проценте бластных клеток диагностируется МДС. Необходимо отметить, что из популяции неэритроидных клеток (НЭК) исключаются не только все эритрокариоциты, но и лимфоциты, плазматические клетки, макрофаги и тучные клетки. Таким образом, неэритроидный компонент костного мозга включает только бластные клетки и созравающие элементы гранулоцитарной и моноцитарной серий.

Кроме корректного подсчета процента бластов, диагностика ОМЛ предполагает обязательное выявление цитохимических маркеров миелоидной дифференцировки лейкемических клеток.

Обязательные цитохимические реакции включают: 1) выявление миелопероксидазы (МПО) и/или липидов; 2) исследование активности неспецифических эстераз: альфа-нафтилацетатэстеразы (АНАЭ) и/или альфа-нафтилбутиратэстеразы (АНБЭ) с оценкой чувствительности реакции к ингибиции фторидом натрия.

МПО — высокоспецифичный маркер миелоидной дифференцировки и может обнаруживаться в отсутствие азурофильных гранул в бластах 1-го типа. Липиды обычно выявляются в высокой корреляции с МПО, но могут обнаруживаться в менее зрелых миелобластах в отсутствие МПО, т. е. являются более чувствительным (на уровне световой микроскопии) маркером миелоидной дифференцировки. Однако в редких случаях ОЛЛ липиды выявляются и в лейкемических лимфобластах.

Распределение МПО и липидов различается в клетках гранулоцитарной и моноцитарной линий дифференцировки. В миелобластах МПО и липиды расположены компактно, чаще на одном полюсе клетки, а в моноцитарных клетках — в виде рассеянных гранул.

В соответствии с ФАБ-критериями ОМЛ для подтверждения миелоидной природы бластов необходимо выявить 3% и более бластных клеток, положительных на МПО и/или липиды. Выявление МПО и/или липидов имеет наибольшую диагностическую ценность в случае ОМЛ с проявлением гранулоцитарной дифференцировки (варианты M1—M4), поскольку "чистые" моноцитарные, мегакариобластные и лейкемии из малодифференцированных эритроидных предшественников в большинстве случаев отрицательны по этим реакциям. Моноцитарная природа лейкемической популяции подтверждается выявлением в бластных клетках неспецифических эстераз (АНАЭ и АНБЭ), чувствительных к ингибирующему действию фторида натрия. Дополнительным тестом может служить измерение уровня лизоцима в сыворотке крови или моче. Лейкемические мегакариобласты также могут давать положительную реакцию на АНАЭ, однако в отличие от клеток моноцитарной серии они отрицательны на АНБЭ. Эстеразная активность в мегакариобластах часто локализуется в зоне Гольджи. Эритробласты при Мб-варианте ОМЛ также обычно положительны в реакциях на АНАЭ и на АНБЭ.

Заключительный этап диагностики ОМЛ связан с определением варианта заболевания. Выполнение этого этапа требует обязательного исследования мазков периферической крови. В табл. 1 суммированы основные критерии диагностики вариантов ОМЛ в соответствии с предложениями ФАБ-группы.

Таблица 1

Критерия диагностики вариантов ОМЛ