Методические указания по учебно-исследовательской работе студентов (УИРС), страница 13

   9) воронки стеклянные;

  10) колбы мерные объемом 50 мл;

  11) колбы конические объемом 200 мл;

  12) пипетки градуированные объемом 1 и 10 мл;

  13) бюретка для титрования;

  14) цилиндр мерный объемом 10 мл;

  15) фотоэлектроколориметр;

  16) термостат;

  17) баня водяная;

  18) растворы ингибиторов.

Ход работы

     Для исследования  действия  одного  ингибитора требуется по 6 конических колб объемом по 200 мл, в которые вносят по 50 мл раствора белкового субстрата и по 5мл раствора фермента.  После чего в колбы приливают 0,1% раствор ингибитора и дистиллированную воду в количествах,  указанных в таблице 2.  Затем все колбы направляют на термостатирование при 45º С в течение 60 минут.

     После окончания термостатирования колбы прогревают на кипящей водяной бане 10 минут для прекращения реакции ферментативного гидролиза. Содержимое колб фильтруют через бумажный фильтр и охлаждают до  комнатной  температуры.  Полученный  фильтрат направляют на определение азота формольно-титруемых аминогрупп по методу Черногорцева или калориметрическое определение относительного количества продуктов  гидролиза модифицированным методом Лоури.  

 Таблица 2

Номер колбы

Вносимое количество дистиллиров. воды, мл

Вносимое количест-во раствора NаЭДТА, мл

Номер колбы

Вносимое колво дистилли-рованной воды, мл

Вносимое количество раствора NаЭДТА, мл

1

10

0

4

6,0

4

2

9,0

1

5

4,0

6

3

8,0

2

6

0

10

6. ПЕРЕЧЕНЬ РЕКОМЕНДУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

 1. Дроздов Н.С., Матеранская Н.П.  Практикум по биологической химии. -  М.:Высшая    школа, 1970 г.

 2. Збарский  И.Б.,  Иванов  И.И.,Мардашев  С.Р.  Биологическая  химия.-Л.: Медицина, 1972 г.

 3. Ленинджер А. Биохимия.- М.:, Мир, 1974 г.

 4. Малер Г.,  Кордес Ю.  Основы биологической химии.-М.:  Мир, 1970 г.

 5. Мальком Лав.  Химическая биология рыб.-М.: Пищевая промышлен ность, 1976 г.

 6. Кизеветтер И.В. Биохимия сырья водного происхождения.-М.:, Пищевая промышленность, 1973 г.

 7. Кучеренко Н.Е. и др. Биохимия. Практикум. - Киев.: Выща школа,1988 г.

 8. Рис Э., Стербент М. От клеток к атомам. Иллюстрированное введение в молекулярную биологию. - М.: Мир, 1988 г.

 9. Сорвачев К.Ф. Биологическая химия. -М.: Просвещение, 1971г.

10. Фердман Д.Л. Биохимия. -М.: Высшая школа, 1966 г.

11. Филиппович Ю.Б. и др. Основы биохимии.-М.:,Высшая школа, 1968 г.

12. Штауб Ф.Б. Биохимия. - Будапешт, Fdojt,1965 г. (рус. язык).