Свойства оксида алюминия как сорбента для ТСХ существенно зависят от способа его получения и последующей обработки. Для определения степени активности Al2O3 в определенных условиях проводят хроматографирование модельной системы – растворов азокрасителей, значения Rf которых зависят от степени активности Al2O3.
Кроме свойств сорбента, вторым важным фактором для успешного разделения методом ТСХ является состав подвижного растворителя (элюента), который может быть подобран с учетом свойств разделяемых компонентов.
После выбора соответствующего растворителя для разделения смеси азокрасителей на оксиде алюминия с определенной степенью активности проводится качественный анализ смеси, компоненты которой идентифицируются по значениям Rf, окраске и форме хроматографических зон.
Выполнение работы
1. Приготовление пластинок с незакрепленным слоем сорбента. Чистую сухую пластинку кладут на специальную подставку матовой стороной вверх и на ее поверхность насыпают сорбент, разравнивают его металлическим валиком, так что с самого края пластинки слой снимается, а на поверхности остается слой толщиной ~1 мм. Разравнивать слой, подсыпая новые порции сорбента, необходимо до тех пор, пока не получится гладкая поверхность слоя сорбента.
2. Нанесение проб. На расстоянии 1–1,5 см от края пластинки мысленно намечают линию старта, где примерно на равном друг от друга расстоянии с помощью капилляров наносят пробы растворов «свидетелей» и анализируемой смеси (2 зоны с разным объемом раствора); при этом стараются получить первичные зоны как можно меньшого размера. Объем проб – 3–5 мкл.
3. Хроматографирование. Край пластинки опускают в подвижный растворитель, находящийся на дне хроматографической камеры так, чтобы линия старта не была погружена в растворитель. Пластинку устанавливают в наклонном положении и камеру герметически закрывают. После того как подвижный растворитель проходит ~2/3 длины пластины, ее вынимают и подсушивают на воздухе.
5. Определение активности сорбента и выбор оптимального состава растворителя. На приготовленные пластины с тонким слоем Al2O3 (2 шт.) наносят растворы азокрасителей (2–3 капли с промежуточным просушиванием), анализируемую смесь и помещают их в хроматографические камеры: одну – с CCl4, вторую – с CHCl3. Определяют значения Rf азокрасителей, сравнивают полученные хроматограммы и обсуждают с преподавателем состав элюента, который может быть использован для разделения анализируемой смеси.
6. Качественный анализ азокрасителей. На пластинку с сорбентом наносят пробы «свидетелей» и анализируемой смеси, проводят разделение в смешанном растворителе (CCl4 + CHCl3) выбранного состава, а по значениям Rf, окраске и форме зон идентифицируют компоненты.
Задания и вопросы
1. Зарисуйте в рабочий журнал все хроматограммы и занесите в таблицу данные по результатам хроматографирования азокрасителей в разных условиях (Rf, окраска, форма зон).
2. Определите степень активности оксида алюминия по Брокману и объясните смысл этого понятия. Как получить Al2O3 с другой степенью активности?
3. Чем определяются свойства Al2O3 как сорбента? Какие формы и модификации его используются в хроматографии?
4. Чем обусловлен цвет и интенсивность окраски азокрасителей?
5. С чем связано различие в элюрующей способности CCl4 и CHCl3? Как меняются свойства смешанного растворителя в зависимости от состава?
6. Объясните зависимость Rf от химического строения азокрасителя.
ТСХ 2. Качественный и полуколичественный анализ красителей для текстильной промышленности методом ТСХ
Приборы, реактивы, посуда
1. Камера для хроматографирования.
2. Хроматоскоп.
3. Пластины «Silufol UV-254» (15 × 15 см) или аналогичные.
4. Растворитель – хлороформ + диэтиламин (9:1 по объему).
5. Водные растворы красителей (1 мг/мл): АЗ – активный зеленый, ДР – дисперсный розовый, АЖ – акридиновый желтый, ДК –дисперсный красный, ХР – хризоидин, БЗ – бриллиантовый зеленый, КФ – кислотный фиолетовый.
Уважаемый посетитель!
Чтобы распечатать файл, скачайте его (в формате Word).
Ссылка на скачивание - внизу страницы.