Белки системы комплемента: свойства и биологическая активность, страница 10

Исследование системы комплемента включает определение в сыворотке крови содержания отдельных белков и оценку их ин­дивидуальной функциональной активности и активности всей системы в целом. При определении содержания в крови белков комплемента используются иммунохимические методы анализа, в которых применяются моно- или поликлональные иммунные сы­воротки против отдельных белков системы. Содержание тех или иных компонентов комплемента определяют в опытах "ракетно­го" иммуноэлектрофореза, радиальной иммунодиффузии, количе­ственной иммунонефелометрии, иммуноферментного и имму-нофлюорссиентного анализа. Цитоиммунофлюоресцентные мето-

дики используются при исследовании содержания на клетках от­дельных белков комплемента, рецепторов к ним и иммобилизо­ванных ингибиторов комплемента. В настоящее время имеются иммунные сыворотки против всех компонентов комплемента, ос­новных регуляторных белков и некоторых субкомпонентов клас­сического и альтернативного путей активации комплемента.

Функциональная активность системы комплемента оцени­вается в реакции гемолиза сенсибилизированных антителами эритроцитов. Для количественной характеристики активности комплемента предложено гемолитическую активность компле­мента выражать в единицах 50% гемолиза. За единицу 50% ге­молиза (СН50) принимают количество комплемента, обеспечи­вающего лизис 50% сенсибилизированных эритроцитов во взве­си клеток определенных густоты и объема. Исследование гемоли-тической активности комплемента достаточно надежно характе­ризует функцию системы комплемента в целом. Снижение гемо-литической активности комплемента у больных может быть свя­зано с накоплением в крови у обследуемых иммунных комплек­сов антиген—антитело, снижением синтеза или возросшим ката­болизмом отдельных компонентов системы и, наконец, повы­шенным синтезом растворимых ингибиторов комплемента. Ино­гда на фоне нормального содержания в крови белков комплемен­та функциональная активность системы может быть снижена в связи с изменениями у больных в структурных генах соответст­вующих компонентов комплемента. Для выявления таких поло­мок приходится использовать реакцию гемолиза, восполняя при этом комплемент в сыворотке обследуемых функционально пол­ноценными индивидуальными компонентами комплемента.

В качестве реагентов для выявления функциональной актив­ности отдельных компонентов С'используются также сыворотки лиц с генетическим дефицитом определенных белков С'. В опы­тах иммунного гемолиза in vitro сыворотка обследуемого воспол­няет отсутствующий в генетически дефицитной сыворотке ком­понент комплемента.

О 4:>ункциональной активности белков классического и альтернативного путей активации комплемента удается также судить косвенно, выявляя в обследуемой сыворотке содержа­ние таких продуктов активации С', как С3с1 (классический путь активации) или Ва (альтернативный путь активации).

Вопросы для самоконтроля

1. Каковы основные механизмы активации белков системы комплемента?

2. Какие из продуктов активации системы комплемента ха­рактеризуются как анафилатоксины?

3. Какие из компонентов комплемента участвуют в лизисе кле-ток-мишеией (образование мембранодтакующего комплекса)?

4. Какие белки осуществляют регуляцию активации белков системы комплемента?

5. Какой мммунобиологической функцией обладают белки системы комплемента?

6. В чем заключается эффскторная активность белков систе­мы комплемента?

7. В чем заключается регуляторная функция белков систе­мы комплемента?

РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА

1. Долгов В. В., Шевченко О. П. Лабораторная диагностика нару­шения обмена белков. — М., 1997.

2. Клиническая иммунология и аллергология / Под ред. Л. Йеге-ра: Пер. с нем. — М., 1990. — Т. 1.

3. Ярилин А. А. Основы иммунологии. — М., 1999.

4. Campbell R. D., Law S. K., Reid К. В., Sim R. B. // Ann.Rev. Im-munol. — 1988. — Vol. 6. — P. 161—195.

5. Carroll М. С. I/ Ibid. — 1998. — Vol. 16. — P. 545—568.

6. Sliles D. P., Ten- A. 1., Parslow T. G. Medical Immunology. — Connecticut, 1997.

Поступила 28.02.2000

КЛИНИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА, № 7, 2000

клеток. Поэтому эти субкомпоненты комплемента являются

эндогенными опсонинами, усиливающими захват и завершен­ность фагоцитоза в отношении объектов, несущих на себе со­ответствующие молекулы комплемента.

Рецепторы к СЗЬ (CR-1) имеют и эритроциты человека, которые фиксируют на себе мультимолекулярные иммунные комплексы (в том числе и комплексы аутоантигенов и аутоан-тител) и обеспечивают их транспортировку из тканей и удале­ние из циркуляции в селезенке и синусоидах печени.

С Is, СЗа, С4а и С5а обладают способностью активировать тучные клетки и базофилы, вызывая их дегрануляцию и актива­цию синтеза и секрецию разнообразных медиаторов аллергиче­ского воспаления. СЗа и С5а вызывают также сокращение глад­кой мускулатуры и повышают проницаемость сосудистой стенки. Такая иммунобиологическая активность СЗа- и С5а-субкомпо-

нентов комплемента позволила их называть анафилатоксинами.

Рецепторы к некоторым субкомпонентам комплемента имеют дендритные клетки селезенки и лимфоузлов, В-лимфо-циты, некоторые субпопуляции Т-лимфоцитов и NK-клетки. Благодаря этим рецепторам осуществляется длительное депони­рование комплексов антиген—комплемент в дендритных клетках и активное взаимодействие этих антигенпредставляющих клеток и В-лимфоцитов. Такое взаимодействие усиливает пролиферацию антигенспецифических В-лимфоцитов и активную их диффе-ренцировку в малые долгоживущие В-лимфоциты — носители иммунологической памяти. Сигналы, подаваемые лимфоцитам через CR-1-рецепторы, способны также выступать в качестве костимулов при IL-2-зависимой пролиферации лимфоцитов.

CR-3- и С I q- R-рецепторы выявлены у NK-клеток, и воз-

действие на эти клетки соответствующих лигандов обеспечи­вает активацию и усиление цитотоксичности МК-клеток.

Исследования характера воспаления и продукции антител у линейных животных с генетическими дефектами белков системы С' подтвердили данные об участии различных субкомпонентов С' в воспалительных реакциях и в иммунном ответе организма.

У людей врожденные или приобретенные дефекты синтеза отдельных компонентов С'проявляются высокой чувствительно-

стью к пиогенным и "капсульным" инфекциям, склонностью к

развитию аутоиммунных заболеваний (табл. 4). Повышенная ак­тивность комплемента, связанная, например, с наследственным